支原体通用染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称
英文名称
Mycoplasma spp. Universal Dye-based qPCR Kit
规格
50T
货号
PR3468
检验原理
本试剂盒基于荧光定量PCR技术，针对支原体16S rRNA基因高度保守区域设计特异性引物及荧光染料。通过实时监测PCR扩增过程中双链DNA与染料的结合荧光信号，实现对支原体DNA的定量检测，适用于临床或实验室样本的病原学诊断。
试剂组成
MYCO-U反应液：500μL×2管
酶液：50μL×1管
阳性质控品：50μL×1管（含支原体特异性片段）
阴性质控品：250μL×1管（无核酸酶水）
注：不同批号组分不可混用。
储存条件及有效期
储存：-20℃±5℃避光保存，运输需冷链。
稳定性：反复冻融≤5次，有效期12个月。
适用仪器
兼容主流荧光定量PCR仪，包括但不限于：
ABI 7500
安捷伦 MX3000P/3005P
Roche LightCycler
Bio-Rad CFX系列
Eppendorf Mastercycler ep realplex
样本要求
可检样本类型：
细胞培养上清液
血清、唾液、尿液、鼻腔分泌物等体液
其他无菌采集液体样本
样本处理与保存：
短期（24小时内）：2~8℃保存。
长期：-70℃以下保存，冻融≤3次。
操作流程
核酸提取：按标准方法提取样本DNA。
反应体系配制：按比例混合反应液、酶液及模板DNA。
PCR扩增：
预变性：95℃ 5分钟
循环参数：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40循环，荧光采集）
结果判读：通过CT值及扩增曲线分析，阳性质控CT值≤35且阴性无扩增时结果有效。
性能参数
灵敏度：可检测低至10 copies/μL的支原体DNA。
特异性：对常见细菌、真菌无交叉反应。
检测时间：约1.5小时（含扩增与数据分析）。
注意事项
实验需在无菌环境下操作，避免污染。
试剂解冻后需彻底混匀并短暂离心。
建议每批次实验同步运行阴阳性质控。
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