小鼠表面活性蛋白D(SFTPD/SP-D)elisa试剂盒

一、产品定位

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法，专用于定量检测小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）、肺组织匀浆或血清中的表面活性蛋白D（Surfactant Protein D, SP-D），为肺部炎症、纤维化和感染性疾病研究提供关键生物标志物检测方案。核心优势：

天然构象识别：特异性结合SP-D胶原样区（aa 58-148）

超灵敏检测：最低检出限0.2 ng/mL，可检测微量肺泡渗出液

复合物兼容：可检测SP-D与病原体（如流感病毒HA蛋白）的复合物

 二、技术原理

graph LR

A[SP-D单体/多聚体] --> B(预包被单抗6B2)

B --> C(生物素化检测单抗3D6)

C --> D(SA-HRP信号放大)

D --> E[化学发光检测]

三、关键参数

参数  指标

检测范围  0.5-100 ng/mL

灵敏度（LLoQ）  0.15 ng/mL

精密度  板内CV<5%，板间CV<8%

样本需求  BALF仅需20μL

检测时长  80分钟优化流程

四、样本处理指南

BALF采集：

麻醉后气管插管

注入0.5mL PBS+0.6mM EDTA

回收率>85%（三次灌洗合并）

肺组织处理：

肺匀浆制备流程

def lung_homogenize():

add_lysis_buffer(1:10 w/v)  # 含蛋白酶抑制剂

homogenize(2000rpm, 1min)

centrifuge(12000g, 15min)

return supernatant

保存条件：

短期：4℃ 24h（含1mM PMSF）

长期：-80℃单次冻存

五、操作流程优化

基质效应消除：

BALF样本用标准稀释液1:5预稀释

添加0.1% CHAPS增强SP-D解离

多聚体检测：

非还原条件保留天然寡聚体结构

结果以十二聚体当量计算

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