小鼠趋化因子CCL8(MCP-2 (CCL8))elisa试剂盒
一、检测目标与生物学意义
1. 目标分子
CCL8（MCP-2）属于CC趋化因子家族，由巨噬细胞、内皮细胞等分泌，通过结合CCR1/CCR2/CCR5受体招募单核细胞、T细胞及嗜酸性粒细胞，在Th2型免疫反应、过敏性疾病及肿瘤免疫逃逸中起关键作用。
2. 检测价值
过敏与哮喘模型：OVA致敏小鼠的肺组织中CCL8水平与嗜酸性粒细胞浸润正相关。
肿瘤微环境：乳腺癌（如4T1模型）中CCL8高表达与M2型巨噬细胞极化相关。
病毒感染：呼吸道合胞病毒（RSV）感染后CCL8促进Th2细胞募集。
二、试剂盒核心参数
参数 技术细节
检测原理 双抗体夹心ELISA（抗小鼠CCL8单抗对）
灵敏度 2–5 pg/mL（高敏版本可达1 pg/mL）
检测范围 10–2000 pg/mL（覆盖病理浓度）
样本类型 血清、支气管肺泡灌洗液（BALF）、肿瘤组织匀浆
交叉反应 不与CCL7/MCP-3或CCL13/MCP-4交叉
检测时间 3.5小时（含封闭步骤减少背景信号）
三、实验操作关键点
样本处理
BALF样本：灌洗液需离心（500×g, 10分钟）去除细胞碎片，-80℃分装保存。
肿瘤组织：建议使用含蛋白酶抑制剂的RIPA缓冲液（1:5 w/v匀浆）。
标准化流程
步骤1：标准品/样本与预包被抗体孵育（室温, 2小时）。
步骤2：生物素化二抗→链霉亲和素-HRP→TMB显色（双波长450/570 nm检测）。
数据分析：推荐5参数拟合（5PL）算法，低浓度样本（<20 pg/mL）建议复测。
干扰控制
高脂样本：脂肪组织需超速离心（100,000×g, 1小时）去除脂蛋白干扰。
四、典型模型数据参考
小鼠模型 CCL8浓度范围 关联表型
OVA诱导哮喘 BALF: 200–1500 pg/mL 嗜酸性粒细胞计数↑
4T1乳腺癌模型 肿瘤组织: 500–3000 pg/mL CD206+ M2巨噬细胞浸润↑
RSV感染模型 肺组织: 100–800 pg/mL IL-4/IL-5分泌水平↑
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