小鼠Mouse PD-L1(PD-L1)elisa试剂盒
一、检测目标与生物学意义
1. 目标分子
PD-L1（Programmed Death-Ligand 1）是B7家族免疫检查点分子，在肿瘤细胞、抗原呈递细胞（APCs）及炎症组织中高表达，通过结合PD-1受体抑制T细胞功能，介导免疫逃逸和肿瘤微环境免疫抑制。
2. 检测价值
肿瘤免疫治疗：评估抗PD-1/PD-L1抗体（如Keytruda）的疗效预测标志物。
自身免疫病模型：PD-L1缺陷小鼠（如PD-L1 KO）易发生自身免疫性心肌炎。
感染免疫：慢性病毒感染（如LCMV）中PD-L1上调与T细胞耗竭相关。
二、试剂盒核心参数
参数 技术细节
检测原理 双抗体夹心ELISA（抗小鼠PD-L1单抗对）
灵敏度 1–3 pg/mL（高敏版本可达0.5 pg/mL）
检测范围 5–1000 pg/mL（覆盖血清/组织匀浆典型浓度）
样本类型 血清、血浆（EDTA）、肿瘤组织匀浆、细胞上清
交叉反应 不与PD-L2或B7-H3交叉（特异性>99%）
检测时间 3小时（含封闭步骤减少非特异性结合）
三、实验操作关键点
样本处理
肿瘤组织匀浆：建议使用含蛋白酶抑制剂的RIPA缓冲液（1:5 w/v匀浆），离心（12,000×g, 15分钟）取上清。
血清/血浆：避免反复冻融（≤3次），4℃短期保存≤24小时。
标准化流程
步骤1：样本与预包被抗体孵育（37℃, 90分钟）。
步骤2：生物素化二抗→链霉亲和素-HRP→TMB显色（450/630 nm双波长检测）。
数据分析：推荐5参数拟合（5PL）算法，结果以pg/mL或pg/mg蛋白报告。
干扰控制
假阳性风险：样本中可溶性PD-L1（sPD-L1）需注明（可能与膜结合型区分检测）。
四、典型应用数据
小鼠模型 PD-L1浓度范围 生物学关联
MC38结肠癌模型 肿瘤组织: 200–1500 pg/mL 联合抗PD-1治疗响应预测
自身免疫性肝炎 血清: 50–300 pg/mL 疾病活动期显著升高
正常C57BL/6 血清: <20 pg/mL 基线表达水平
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