一、试剂盒核心信息
检测目标:大鼠B7-H1/PD-L1(CD274),一种免疫检查点蛋白,通过结合PD-1抑制T细胞活性,参与免疫逃逸。
方法学:双抗体夹心ELISA,特异性检测可溶性PD-L1(检测波长450 nm)。
适用样本:血清、血浆(EDTA/肝素抗凝)、细胞培养上清液(需离心去除碎片)、组织匀浆液(建议添加蛋白酶抑制剂)。
产品名称 | 大鼠B7-H1/PD-L1elisa试剂盒 | 货号 | XG-R1424 |
英文名称 | RatB7-H1/PD-L1 ELISA Kit | 规格 | 48T\96T |
二、关键组分与性能特点
1. 主要组分
预包被板:抗大鼠PD-L1单克隆抗体包被的96孔板(部分品牌提供可拆卸条板)。
标准品:重组大鼠PD-L1(浓度梯度通常为10–2000 pg/mL,覆盖低丰度检测需求)。
检测系统:生物素-链霉亲和素放大系统(高信噪比),TMB显色。
辅助试剂:洗涤缓冲液(含Tween-20)、终止液(2M HSO)。
2. 性能参数
灵敏度:最低检测限可达5 pg/mL(高灵敏度版本可至1 pg/mL)。
特异性:不交叉反应大鼠PD-L2、B7-H3等同家族蛋白。
稳定性:未开封试剂盒4℃保存有效期至2026年(标准品需-80℃保存)。
三、实验流程与优化建议
1. 简化步骤
① 样本预处理(离心去除颗粒物,稀释至线性范围内)→ ② 加样孵育(37℃ 1.5小时)→ ③ 洗涤5次→ ④ 加二抗孵育(30分钟)→ ⑤ 显色(避光15分钟)→ ⑥ 终止后30分钟内读数。
2. 关键注意事项
样本保存:避免反复冻融(推荐分装后-80℃保存,仅冻融1次)。
干扰排除:高浓度血红蛋白(>10 mg/mL)或甘油三酯(>3 mg/mL)需稀释后验证。
标准曲线:建议使用四参数逻辑(4PL)拟合,确保低浓度区准确性。
四、应用场景
肿瘤免疫研究:评估肿瘤微环境中PD-L1表达水平与免疫治疗响应关系。
自身免疫疾病:如大鼠类风湿性关节炎模型中PD-L1/PD-1通路调控机制。
感染免疫:慢性病毒感染(如LCMV)的免疫耗竭研究。
五、时效性提示
技术更新:2025年部分品牌推出“快速版”(90分钟完成检测),适合高通量筛选。
替代方案:若需检测膜结合型PD-L1,建议结合流式细胞术或免疫组化。
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关键字: 大鼠; B7-H1/PD-L1;elisa试剂盒;
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