1. 概述
RBD蛋白是SARS-CoV-2刺突蛋白的关键功能域(分子量约25 kDa),介导病毒与ACE2受体的结合。本试剂盒采用高纯度重组RBD蛋白(基于WH01毒株),用于检测中和抗体、疫苗效价评估及抗体依赖性增强(ADE)效应研究,适用于科研与临床诊断。
产品名称 | 重组COVID-19 RBD蛋白(RBD protein)elisa试剂盒 | 货号 | XG-EC1306 |
英文名称 | RBD protein Elisa Kit | 规格 | 48T\96T |
2. 检测原理
间接ELISA(中和抗体表位保留):
包被抗原:His标签重组RBD(aa 319-541)预包被微孔板
抗体结合:血清样本中抗RBD IgG与抗原特异性结合
信号检测:HRP标记抗人IgG催化TMB显色(检测范围:0.1-100 μg/mL)
3. 试剂盒组成
组分 规格 保存条件 关键特性
预包被板 96T(可拆) 2-8℃ 高密度包被(1μg/孔)
RBD标准品 0.1-100 μg/mL -80℃ 纯度>95%(SEC-HPLC)
酶标二抗 1.2 mL -20℃ 抗人IgG(Fc特异性)
样本稀释液 50 mL 4℃ 含0.5% BSA的PBST
阻断缓冲液 20 mL 室温 含5%脱脂奶粉
4. 样本要求
适用样本:
人/动物血清(56℃ 30min灭活)
疫苗免疫后血清(建议采集2-4周样本)
细胞培养上清(需10倍浓缩)
前处理方法:
血清:1:100起始稀释(可梯度稀释至1:102400)
高脂血:脂蛋白沉淀处理
结果判读:
阳性阈值:OD值≥阴性对照2.1倍
中和抗体预测:>15 μg/mL对应PRNT50≥1:40
5. 实验流程优化
标准曲线建立:
0.1、1、10、50、100 μg/mL梯度
四参数拟合(R2≥0.99)
抗干扰设计:
添加10%正常鼠血清阻断异嗜性抗体
含RF样本需IgG吸附处理
质控体系:
WHO国际标准品(NIBSC 20/136)校准
批间CV<10%(n=20)
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