商品属性
产品名称 | 大鼠B7-H1/PD-L1elisa试剂盒 | 英文名称 | RatB7-H1/PD-L1 ELISA Kit |
检测范围 |
| 货号 | PR33554 |
检测原理
采用双抗体夹心法酶联免疫吸附技术(ELISA)。微孔板预包被抗大鼠B7-H1/PD-L1抗体,加入待测样本或标准品后,与生物素标记的检测抗体形成复合物。洗涤后加入HRP标记的链霉亲和素,通过底物TMB显色反应(蓝色→黄色),在450 nm波长下测定吸光度(OD值),样本浓度与OD值呈正相关。

试剂盒组成
| 组分 | 96T配置 | 48T配置 | 保存条件 |
| 预包被微孔板 | 1×96孔 | 1×48孔 | 2-8℃干燥 |
| B7-H1/PD-L1标准品 | 40 μg/mL(0.6 mL)| 40 μg/mL(0.3 mL)| -20℃(稀释后勿冻存)|
| 生物素标记抗体 | 6 mL | 3 mL | 2-8℃ |
| HRP-链霉亲和素 | 10 mL | 5 mL | 2-8℃避光 |
| 洗涤缓冲液(20×) | 20 mL | 10 mL | 2-8℃(现用现稀释)|
| 底物A/B液 | 各6 mL | 各3 mL | 2-8℃避光 |
| 终止液 | 6 mL | 3 mL | 2-8℃ |
| 样本稀释液 | 12 mL | 6 mL | 2-8℃ |
样本要求
类型:血清、血浆(EDTA/肝素抗凝)、细胞上清液或组织匀浆。
处理:
血清/血浆:采集后2小时内离心(3000×g,10分钟),-20℃分装保存,避免反复冻融。
组织匀浆:按1:9(w/v)加入PBS匀浆后离心取上清。
禁用:含NaN₃或溶血样本(干扰HRP活性)。
操作步骤
标准品稀释:按说明书梯度稀释(建议范围:5-1000 pg/mL)。
加样:每孔加入50 μL标准品或样本,37℃孵育30分钟。
洗涤:弃液后加满洗涤液,静置30秒,重复5次。
显色:依次加入底物A/B各50 μL,避光反应15分钟。
终止:加入50 μL终止液,15分钟内测定OD450值。
注意事项
试剂使用前需平衡至室温,避免交叉污染。
不同批号组分不可混用,开封后需密封保存。
终止液为酸性溶液,接触后立即用水冲洗。
计算与分析
以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制曲线,通过四参数拟合方程计算样本浓度。
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关键字: 大鼠;B7-H1/PD-L1;ELISA试剂盒;
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