大鼠Granzyme Belisa试剂盒
一、试剂盒核心信息
检测目标
Granzyme B：一种丝氨酸蛋白酶，由细胞毒性T细胞（CTL）和NK细胞分泌，通过 caspase 依赖性途径诱导靶细胞凋亡，是评估细胞免疫杀伤活性的关键指标。
种属特异性：适配大鼠样本。
产品名称 | 大鼠Granzyme Belisa试剂盒 | 货号 | XG-R1462 |
英文名称 | RatGranzyme B ELISA Kit | 规格 | 48T\96T |
适用样本类型
血清、血浆（肝素/EDTA抗凝）、细胞培养上清（如活化T细胞或NK细胞）、组织匀浆（如脾脏或肿瘤微环境）。
性能参数
检测范围：10–500 pg/mL 灵敏度3 pg/mL）。
检测时间：4小时（含孵育与显色步骤）。
二、实验原理与关键技术要点
双抗体夹心法流程
步骤优化：
① 预包被抗大鼠Granzyme B单抗（克隆号：GB11）→ ② 样本孵育（2小时，室温）→ ③ 生物素化检测抗体（1小时）→ ④ Streptavidin-HRP显色（20分钟）。
关键控制：
细胞培养上清需离心（1000×g，5分钟）去除碎片；
避免样本反复冻融（活性易丧失）。
数据校正建议
结合流式细胞术检测CD8+ T细胞或NK细胞活性；
高浓度样本需稀释验证（线性稀释回收率应达85–115%）。
三、核心应用场景与科研价值
免疫治疗研究
CAR-T细胞疗法：评估Granzyme B释放与肿瘤细胞杀伤效率的关联。
病毒感染模型
慢性病毒感染（如LCMV）：分析T细胞耗竭与Granzyme B分泌减少的关系。
自身免疫疾病
类风湿关节炎：探究滑膜中CTL的异常活化机制。
四、操作常见问题与解决方案
问题类型 可能原因 解决方案
检测值低于预期 样本采集时间不当（活化后6–24小时为分泌峰值） 优化采样时间点
孔间变异大 洗涤不彻底或孵育温度波动 使用洗板机，确保恒温环境（±1℃）
标准品溶解不全 冻干标准品未充分复溶 37℃水浴5分钟，涡旋混匀
五、延伸研究方向
多色流式检测Granzyme B与Perforin共表达；
联检细胞因子（如IFN-γ、TNF-α）解析免疫应答网络。
公司正在出售的产品：
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