小鼠Granzyme Belisa试剂盒
产品特点:
高灵敏度:灵敏度通常为0.91 pg/ml。
特异性强:采用双抗体夹心法,能特异性识别小鼠Granzyme B,避免交叉反应。
操作简便:提供完整的试剂和详细的实验步骤,方便科研人员操作。
结果准确:标准品线性回归相关系数R值≥0.9900,确保结果的可靠性。
英文名称 | Mouse Granzyme B ELISA Kit | 产品类别 | Mouse/小鼠Elisa试剂盒 |
货号 | A129924 | 规格 | 48T/96T |

检测原理
双抗体夹心法:将抗Granzyme B单克隆抗体包被在酶标板上,加入标准品或样本,Granzyme B与固相抗体结合。
信号放大:加入生物素化的检测抗体和辣根过氧化物酶(HRP)标记的链霉亲和素,形成免疫复合物。
显色与定量:加入底物TMB显色,颜色深浅与Granzyme B浓度正相关,通过酶标仪在450 nm波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
试剂盒组成
预包被微孔板:96孔或48孔,已包被捕获抗体。
冻干标准品:用于绘制标准曲线。
生物素化检测抗体:用于识别样本中的Granzyme B。
HRP标记的链霉亲和素:用于信号放大。
洗涤液、底物液、终止液:用于反应的洗涤、显色和终止。
其他:封板膜、说明书等。
适用样本
样本类型:血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆等。
样本处理:需按照说明书进行处理,如离心去除沉淀、避免反复冻融等。
检测范围
浓度范围:通常为0.31 ng/ml至20 ng/ml。
保存条件
未开封:4℃保存。
已开封:标准品分装后-20℃保存,其他试剂4℃保存。
注意事项
操作规范:严格按照说明书操作,避免交叉污染。
安全防护:使用终止液时佩戴手套,避免接触皮肤和眼睛。
试剂盒组分:不同批号的试剂盒组分不得混用。
应用领域
科研研究:用于研究Granzyme B在免疫应答、炎症反应、细胞凋亡等生理和病理过程中的作用。
注意事项
严格按照说明书操作,避免交叉污染和非特异性结合。
样本避免反复冻融,未用完的板条密封冷藏(2-8℃)保存。
试剂盒组分不可混用,标准品建议一次性使用。
血浆、血清及组织样本需规范处理,避免溶血和杂质干扰。
该试剂盒具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特点,是兔MIP-3α/CCL20定量检测及相关疾病机制研究的可靠工具,广泛应用于兔免疫、炎症、感染等领域的科研。
常见问题解答 (FAQ)
Q1: 为什么要做“复孔”?
A: 建议每个样本(包括标准品)都做复孔(2-3个孔)。这样可以计算平均值,减少操作误差,提高数据的可信度。
Q2: 样本需要稀释吗?
A: 是的。如果样本浓度过高,超出了标准曲线的检测范围,需要根据预实验结果进行适当稀释。计算最终浓度时,记得乘以稀释倍数。
Q3: 结果出现“花板”(背景不均)怎么办?
A: 可能原因包括:洗板不干净、温育温度不均、加样时产生气泡、或者试剂(如底物)受光照分解。请检查洗板机是否堵塞,确保温育箱温度恒定。
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如何验证试剂盒的特异性?(实操建议):
稀释线性实验 (Linearity):
操作: 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释(如1:2, 1:4, 1:8...)。
预期: 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系(相关系数 R² ≥ 0.98)。如果线性不好,说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test):
操作: 在已知浓度的目标抗原溶液中,加入高浓度的潜在干扰物(如高浓度的脂质或结构类似物),检测其对结果的影响。
预期: 若检测值与理论值偏差在±10%以内,说明抗干扰能力强,特异性好。
回收实验 (Recovery Test):
操作: 在样本中加入已知量的标准品,检测总含量,计算回收率。
预期: 回收率在80%-120%之间,说明试剂盒能准确识别目标,不受样本背景干扰。
关键字: 小鼠;Granzyme B;ELISA试剂盒;
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