1. 基本原理
双抗体夹心ELISA法:试剂盒采用特异性抗大鼠IGFBP-2抗体包被微孔板,样本中的IGFBP-2与抗体结合后,再加入酶标记的二抗,形成“抗体-抗原-酶标二抗”复合物。通过底物显色,颜色深浅与IGFBP-2浓度成正比。
2. 主要组分
预包被微孔板:抗大鼠IGFBP-2单克隆抗体固定于96孔板。
标准品:重组大鼠IGFBP-2(浓度梯度已知,用于绘制标准曲线)。
检测抗体:生物素或HRP标记的二抗。
显色底物:TMB(3,3',5,5'-四甲基联苯胺)或其他显色剂。
终止液(通常为硫酸溶液)。
洗涤缓冲液(如PBS-Tween)。
样本稀释液。
产品名称 | 大鼠IGFBP-2elisa试剂盒 | 货号 | XG-R1469 |
英文名称 | RatIGFBP-2 ELISA Kit | 规格 | 48T\96T |
3. 检测步骤
加样:标准品和待测样本加入微孔板。
孵育:37℃孵育使IGFBP-2与抗体结合。
洗涤:去除未结合物质。
加酶标二抗:形成复合物。
显色:加入底物后避光反应。
终止:加入终止液,颜色由蓝变黄。
检测:450 nm波长测OD值,计算浓度。
4. 技术参数
检测范围:通常为15.6–1000 pg/mL(不同品牌可能有差异)。
灵敏度:最低检测限可达<10 pg/mL。
特异性:仅识别大鼠IGFBP-2,不与其他IGFBP家族交叉反应。
重复性:板内、板间变异系数(CV)<10%。
5. 样本要求
类型:血清、血浆(EDTA/肝素抗凝)、细胞上清。
处理:避免反复冻融,4℃短期保存,-20℃/-80℃长期保存。
稀释:高浓度样本需用稀释液调整至线性范围内。
6. 应用领域
代谢研究:IGFBP-2与肥胖、糖尿病相关。
生长发育:调控IGF-1的生物利用度。
肿瘤研究:某些癌症中IGFBP-2表达异常。
药物开发:评估药物对IGF系统的影响。
7. 注意事项
标准化操作:严格按说明书步骤进行,避免孔间污染。
质量控制:建议每板设置复孔和空白对照。
数据拟合:使用四参数逻辑(4-PL)曲线拟合标准品浓度。
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