大鼠Thrombospondin-1elisa试剂盒
一、试剂盒基本信息
检测目标：大鼠血小板反应蛋白-1（TSP-1）
生物学作用：TSP-1是一种多功能糖蛋白，参与血管生成、血小板聚集、细胞粘附和免疫调节等过程。
检测方法：双抗体夹心ELISA（酶联免疫吸附试验）
产品名称 | 大鼠Thrombospondin-1elisa试剂盒 | 货号 | XG-R1498 |
英文名称 | RatThrombospondin-1 ELISA Kit | 规格 | 48T\96T |
样本类型：
血清（推荐）
血浆（EDTA/肝素抗凝）
组织匀浆（如血管、肿瘤组织）
细胞培养上清
灵敏度：通常 ≤0.1 ng/mL
检测范围：0.5–50 ng/mL
特异性：特异性识别大鼠TSP-1，与人、小鼠TSP-1交叉反应低（需确认说明书）。
二、实验原理
捕获抗体：微孔板预包被抗大鼠TSP-1单抗，结合样本中的TSP-。
检测抗体：加入生物素化或HRP标记的二抗，形成“抗体-抗原-抗体”复合物。
信号放大：链霉亲和素-HRP催化TMB显色（蓝色→黄色）。
定量分析：450 nm测OD值，标准曲线计算TSP-1浓度。
三、试剂盒核心组分
组分 说明
预包被96孔板 抗大鼠TSP-1抗体固定化
TSP-1标准品 重组大鼠TSP-1（冻干粉，需复溶）
HRP标记检测抗体 生物素化或直接酶标
TMB显色液 避光保存，现用现配
终止液（2M HSO） 终止反应，稳定颜色
洗涤缓冲液（20×） PBS含Tween-20，需稀释使用
四、操作流程（简化版）
标准品制备：梯度稀释（0、0.5、2、5、10、20、50 ng/mL）。
加样孵育：样本/标准品加入孔中，37℃孵育1–2小时。
洗涤：洗板3–5次（避免残留）。
二抗孵育：加入HRP标记抗体，37℃孵育1小时。
显色：加TMB避光反应10–15分钟。
终止与检测：加终止液，15分钟内测OD450 nm。
五、典型应用场景
血管生成研究：
评估肿瘤、缺血性疾病模型中TSP-1的表达变化。
血小板功能研究：
检测血栓形成、动脉粥样硬化中TSP-1的作用。
纤维化疾病：
研究肝纤维化、肺纤维化中TSP-1的调控机制。
六、关键注意事项
样本处理：
血清/血浆采集后需尽快分离（2小时内离心，避免反复冻融）。
组织匀浆需充分裂解，离心取上清。
实验优化：
高浓度样本需稀释后检测，避免超出标准曲线范围。
数据可靠性：
建议复孔检测，CV值<10%。
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