1. 试剂盒基本信息
检测目标:人血小板反应蛋白-1(TSP-1/CD36/THBS1)
检测方法:双抗体夹心ELISA(Sandwich ELISA)
样本类型:血清、血浆(枸橼酸钠/EDTA)、血小板裂解液、细胞培养上清、组织匀浆
灵敏度:<0.5 ng/mL(高灵敏度版本可达<0.2 ng/mL)
检测范围:1.56-100 ng/mL(扩展范围0.78-200 ng/mL)
检测时间:3小时(快速检测型2小时)
特异性:不与TSP-2、TSP-4等其他家族成员交叉反应
产品名称 | 人Thrombospondin-1elisa试剂盒 | 货号 | XG-H1698 |
英文名称 | Human Thrombospondin-1 ELISA Kit | 规格 | 48T\96T |
2. 试剂盒核心组分(96T)
组分 规格 保存条件 关键特性
预包被板 8×12孔 2-8℃ 抗TSP-1 C端表位抗体
TSP-1标准品 冻干粉 -20℃ NIST可溯源(0-100 ng/mL)
检测抗体 150 μL -20℃ 生物素标记抗N端表位
酶结合物 150 μL -20℃ HRP-链霉亲和素(1:5000)
超敏TMB 12 mL 4℃避光 低背景配方
终止液 12 mL RT 0.5M H?SO?
血小板裂解缓冲液 15 mL RT 含蛋白酶抑制剂
3. 检测原理图解
graph TD
A[样本TSP-1] --> B[预包被抗体捕获]
B --> C[生物素化二抗结合]
C --> D[SA-HRP信号放大]
D --> E[TMB显色定量]
4. 标准化操作流程
样本预处理:
血小板样本:需用专用裂解液处理(1×10? platelets/mL)
组织样本:建议1:5(w/v) PBS匀浆后离心
标准曲线构建:
7点梯度稀释(1.56、3.125、6.25、12.5、25、50、100 ng/mL)
推荐使用对数坐标纸绘图
关键步骤参数:
封闭:5%脱脂奶粉/PBS 37℃ 1h
一抗孵育:室温摇床2h
信号放大:SA-HRP 1:5000稀释
5. 数据解读标准
正常参考值:
健康人血清:50-200 ng/mL
血小板裂解液:2-5 μg/10? platelets
病理临界值:
肿瘤患者:>300 ng/mL提示不良预后
心血管疾病:<80 ng/mL预示斑块不稳定
6. 前沿应用领域
肿瘤微环境:
血管生成抑制关键分子
免疫检查点PD-1/PD-L1调控因子
纤维化疾病:
肝纤维化分期标志物(与FIB-4指数联用)
肺纤维化治疗靶点
血栓形成:
血小板活化监测(与PF4联合检测)
7. 实验质控要点
干扰排除:
溶血样本:Hb>0.5 g/dL需标注
脂血样本:TG>800 mg/dL需超离
批次验证:
每新批号需做回收率测试(85-115%)
板内CV<8%,板间CV<12%
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