1. 检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法,可同时检测活性GLP-1(7-36 amide)和失活GLP-1(9-36 amide),特异性识别GLP-1的N端和C端表位。微孔板预包被抗GLP-1单克隆抗体,样本中的GLP-1与抗体结合后,加入酶标二抗形成复合物,通过TMB显色系统定量检测。
产品名称
大鼠Total GLP-1elisa试剂盒
货号
XG-R1500
英文名称
RatTotal GLP-1 ELISA Kit
规格
48T\96T
2. 试剂盒组成
组分 规格 保存条件
预包被微孔板 96孔 2-8℃(干燥)
GLP-1标准品 0-200 pM -20℃(冻干)
酶标二抗 120 μL -20℃
DPP-IV抑制剂 1 mL -20℃
TMB底物 10 mL 2-8℃(避光)
终止液 10 mL 室温
血浆预处理液 10 mL -20℃
3. 技术参数
检测范围:2-200 pM(0.6-60 pmol/L)
灵敏度:0.5 pM(0.15 pmol/L)
样本类型:血浆(EDTA抗凝)、肠组织匀浆
检测时间:4.5小时(含样本预处理)
交叉反应:
100% GLP-1(7-36 amide)
100% GLP-1(9-36 amide)
<0.1% GLP-2、GLP-2、GIP
4. 样本采集与处理
血浆采集:
使用含DPP-IV抑制剂(试剂盒提供)的EDTA管采集
立即冰浴,4℃ 1000×g离心10分钟
分装后-80℃保存(避免反复冻融)
组织处理:
肠组织(回肠末端)按1:9(w/v)加入酸性乙醇提取液
4℃匀浆后离心(12000×g,15分钟)
取上清立即检测或-80℃保存
5. 实验步骤
样本预处理(血浆):
加入预处理液(1:1体积比)
4℃孵育30分钟
12000×g离心15分钟
标准品复溶:
用标准品稀释液配制0、2、5、10、20、50、100、200 pM梯度
检测流程:
加样100 μL/孔(标准品/样本)
4℃过夜孵育(16-20小时)
洗板6次
加酶标二抗(100 μL/孔)
室温孵育2小时
TMB显色(精确控制20分钟)
终止反应后立即检测(450nm/630nm)
6. 应用领域
糖尿病研究:GLP-1分泌动态监测
减重手术研究:胃肠激素变化评估
肠道内分泌研究:L细胞功能分析
GLP-1类似药物:药效学评价
7. 注意事项
关键控制点:
必须使用DPP-IV抑制剂(防止GLP-1降解)
显色时间需精确控制(±30秒)
建议使用多通道移液器操作
数据解读:
正常空腹血浆GLP-1:5-15 pM
餐后峰值:20-50 pM
异常值需复查预处理步骤
特殊说明:
不适用于尿液检测
高脂血症样本需超速离心处理
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