大鼠Total GLP-1elisa试剂盒
产品简介:
1. 检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法，可同时检测活性GLP-1（7-36 amide）和失活GLP-1（9-36 amide），特异性识别GLP-1的N端和C端表位。微孔板预包被抗GLP-1单克隆抗体，样本中的GLP-1与抗体结合后，加入酶标二抗形成复合物，通过TMB显色系统定量检测。
英文名称 | RatTotal GLP-1 ELISA Kit | 产品类别 | Rat/大鼠Elisa试剂盒 |
货号 | A129804 | 规格 | 48T/96T |
2. 试剂盒组成
组分 规格 保存条件
预包被微孔板 96孔 2-8℃（干燥）
GLP-1标准品 0-200 pM -20℃（冻干）
酶标二抗 120 μL -20℃
DPP-IV抑制剂 1 mL -20℃
TMB底物 10 mL 2-8℃（避光）
终止液 10 mL 室温
血浆预处理液 10 mL -20℃
3. 技术参数
检测范围：2-200 pM（0.6-60 pmol/L）
灵敏度：0.5 pM（0.15 pmol/L）
样本类型：血浆（EDTA抗凝）、肠组织匀浆
检测时间：4.5小时（含样本预处理）
交叉反应：
100% GLP-1（7-36 amide）
100% GLP-1（9-36 amide）
<0.1% GLP-2、GLP-2、GIP
4. 样本采集与处理
血浆采集：
使用含DPP-IV抑制剂（试剂盒提供）的EDTA管采集
立即冰浴，4℃ 1000×g离心10分钟
分装后-80℃保存（避免反复冻融）
组织处理：
肠组织（回肠末端）按1:9（w/v）加入酸性乙醇提取液
4℃匀浆后离心（12000×g，15分钟）
取上清立即检测或-80℃保存
5. 实验步骤
样本预处理（血浆）：
加入预处理液（1:1体积比）
4℃孵育30分钟
12000×g离心15分钟
标准品复溶：
用标准品稀释液配制0、2、5、10、20、50、100、200 pM梯度
检测流程：
加样100 μL/孔（标准品/样本）
4℃过夜孵育（16-20小时）
洗板6次
加酶标二抗（100 μL/孔）
室温孵育2小时
TMB显色（精确控制20分钟）
终止反应后立即检测（450nm/630nm）
6. 应用领域
糖尿病研究：GLP-1分泌动态监测
减重手术研究：胃肠激素变化评估
肠道内分泌研究：L细胞功能分析
GLP-1类似药物：药效学评价
高脂血症样本需超速离心处理
应用与服务
该试剂盒广泛应用于生物医学研究领域，如机制研究、疾病标志物检测等。部分厂家提供免费代测服务和专业技术支持，方便用户获得准确可靠的实验结果。
操作要点：
需严格遵守试剂盒说明书操作，建议做复孔及标准曲线。
洗涤过程至关重要，洗涤不充分会影响结果准确性。
所有试剂使用前需恢复至室温，避免批号混用。
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如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：
稀释线性实验 (Linearity)：
操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。
预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test)：
操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。
预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。
回收实验 (Recovery Test)：
操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。
预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。
注意事项
试剂盒组分应按说明储存，使用前平衡至室温。
实验中需避免交叉污染，建议使用一次性吸头。
充分混匀对实验结果至关重要。
试剂盒仅供研究使用，不可用于临床诊断。
显色液需避光保存，终止液为2M硫酸，操作时需安全防护。
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