大鼠γ干扰素(IFN-γ)elisa试剂盒

                                             大鼠γ干扰素(IFN-γ)elisa试剂盒
一、试剂盒基本信息

检测目标：大鼠γ干扰素（Interferon-gamma, IFN-γ）

生物学作用：Th1型细胞因子，在抗病毒、抗肿瘤和免疫调节中起关键作用

检测方法：双抗体夹心ELISA

样本类型：

血清（推荐）

血浆（EDTA/肝素抗凝）

细胞培养上清

组织匀浆液

检测范围：15-1000 pg/mL

灵敏度：≤5 pg/mL

检测时间：约4小时（含孵育时间）

样本用量：100 μL/孔

 二、实验原理

包被抗体：微孔板预包被抗大鼠IFN-γ单抗

样本孵育：IFN-γ与包被抗体结合

检测抗体：加入生物素标记的二抗

酶联反应：加入HRP标记的链霉亲和素

显色反应：TMB底物显色（蓝色→黄色）

终止检测：硫酸终止反应，450nm测OD值

三、试剂盒组成

组分  规格  保存条件

预包被微孔板  96孔  2-8℃（干燥）

IFN-γ标准品  冻干粉（0-1000 pg/mL）  -20℃

检测抗体  生物素标记  2-8℃

酶结合物  HRP-链霉亲和素  2-8℃

TMB底物  避光保存  2-8℃

终止液  2M HSO  室温

洗涤缓冲液  20×浓缩  室温

四、样本处理

血清/血浆：

全血室温凝固30分钟后离心（1000×g，20分钟）

避免反复冻融（最多3次）

细胞培养上清：

离心去除细胞碎片（300×g，5分钟）

组织匀浆：

按1:9（w/v）加入PBS匀浆

10000×g离心10分钟取上清

五、标准操作流程

标准品复溶和梯度稀释（0-1000 pg/mL）

加样（标准品/样本100μL/孔）

37℃孵育90分钟

洗板5次（300μL/孔）

加检测抗体（100μL/孔）

37℃孵育60分钟

洗板5次

加酶结合物（100μL/孔）

37℃孵育30分钟

洗板5次

加TMB（100μL/孔）

室温避光显色15-30分钟

加终止液（50μL/孔）

立即测定OD450nm（参考波长630nm）

六、关键注意事项

实验前所有试剂平衡至室温（约30分钟）

严格避免交叉污染（更换枪头）

精确控制孵育时间和温度

洗涤要充分（建议浸泡30秒/次）

显色时间根据室温调整（夏季可缩短）

七、典型应用

免疫应答研究：

评估疫苗免疫效果

感染性疾病模型研究

自身免疫疾病：

类风湿性关节炎模型

多发性硬化研究

肿瘤免疫：

免疫检查点抑制剂疗效评估

CAR-T细胞治疗监测

移植免疫：

移植排斥反应监测

公司正在出售的产品：