产品介绍:

大鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒是一种用于定量检测大鼠血清、血浆、细胞培养上清液及相关生物液体样本中IFN-γ含量的专用科研工具,仅用于科学研究,不用于临床诊断。
产品名称 | 大鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Rat IFN-γ ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A116442 |
检测原理

试剂盒采用双抗体夹心法(Sandwich ELISA)。酶标板上预包被抗大鼠IFN-γ抗体,样本中的IFN-γ与抗体结合后,加入生物素化检测抗体和酶标二抗,形成夹心复合物。洗涤后加入显色底物(如TMB),辣根过氧化物酶催化显色,颜色深浅与IFN-γ浓度呈正相关。终止反应后,用酶标仪在450 nm波长测定吸光度,通过标准曲线计算样品浓度。

主要组成

预包被抗体的酶标板
IFN-γ标准品
生物素化检测抗体
酶标二抗(如HRP标记链霉亲和素)
显色底物(TMB)
终止液
洗涤液
样品稀释液
密封膜/封板膜
样本类型
血清、血浆(EDTA/肝素抗凝)、组织匀浆、细胞上清液、尿液、脑脊液等
性能参数

检测范围:常见为31.25 pg/mL–2000 pg/mL(不同品牌有差异)
灵敏度:最低检测限可达18.75 pg/mL或更低
特异性:不与其它细胞因子或结构类似物交叉反应
重复性:板内和板间变异系数均小于15%
保存与有效期
试剂盒一般2–8 ℃避光保存,有效期为6个月至1年不等,具体以产品批次和品牌为准。
试剂与样本准备阶段

温度平衡(最容易被忽视的点)
操作: 从冰箱取出的试剂盒(包括标准品、酶标试剂、样品等)必须在室温(18-25℃)下平衡 30 分钟。
后果: 冷试剂直接使用会导致孔内温差,产生冷凝水或非特异性背景,严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液: 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配: 酶标试剂和显色液(如 TMB)对光和热敏感,建议在使用前配制工作液,避免失效。
样本处理
避免溶血: 血清样本如果发生溶血(红细胞破裂),会释放过氧化物酶,导致假阳性或背景过高。
离心去杂质: 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心,去除沉淀和悬浮物,防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数: 如果样本浓度过高,超出标准曲线范围,必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
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ELISA试剂盒的主要优点
ELISA之所以被广泛应用,主要归功于以下几个核心优势:
灵敏度高(抓得准):
它利用酶的催化放大作用,能将微弱的信号放大,因此可以检测到样本中极低浓度的目标物质(甚至达到皮克级 pg/mL)。哪怕样本里只有微量的病毒、激素或蛋白质,它也能“捕捉”到。
特异性强(瞄得准):
基于抗原-抗体的特异性结合原理,试剂盒中的抗体通常只与目标物质反应,很少受样本中其他杂质的干扰。这大大降低了假阳性率,结果准确可靠。
操作简便且快速:
相比于一些复杂的仪器分析方法,ELISA的操作流程相对标准化。市面上的试剂盒通常是一套完整的组件,按照说明书进行加样、孵育、洗板、显色即可。整个过程通常在几小时内就能完成。
高通量与适用性广:
它通常采用96孔板或48孔板,一次实验可以同时处理几十个样本,非常适合大规模的流行病学筛查或批量科研实验。此外,它不仅能测蛋白,还能测抗体、激素、药物残留甚至农药,应用领域覆盖了医学、食品安全和环境监测。
安全稳定:
不像放射免疫法那样使用放射性同位素,ELISA使用的是酶标记,对人体和环境无辐射危害,且试剂保存时间较长。
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