大鼠白介素17A(IL-17A)elisa试剂盒
1. 检测原理
采用双抗体夹心ELISA技术，特异性识别大鼠IL-17A（又称CTLA-8）。预包被抗大鼠IL-17A单抗捕获样本中的IL-17A，生物素标记的二抗与HRP-链霉亲和素系统放大信号，TMB显色强度与IL-17A浓度呈正相关。
2. 核心组分
组分 规格 保存 关键特性
预包被板 96T 2-8℃ 高亲和力单抗（克隆号：eBio17CK15A5）
重组标准品 0-1000pg/mL -20℃ 冻干粉，含大鼠IL-17A全长蛋白
生物素-抗体 100μL -20℃ 识别IL-17A二聚体
细胞刺激剂 1mL -20℃ PMA/ionomycin混合液（可选）
阻断缓冲液 15mL 4℃ 含5%BSA的PBS
产品名称 | 大鼠白介素17A(IL-17A)elisa试剂盒 | 货号 | XG-R1512 |
英文名称 | Rat IL-17A ELISA Kit | 规格 | 48T\96T |
3. 性能参数
动态范围：7.8-500pg/mL（扩展至1000pg/mL需样本稀释）
灵敏度：2.3pg/mL（基于3倍空白SD）
样本兼容性：
最佳：激活的脾细胞上清
适用：血清（需1:2稀释）、关节滑液、肠系膜淋巴结匀浆
交叉反应：
大鼠IL-17F：<0.5%
小鼠IL-17A：<0.01%
回收率：92-108%（加标实验）
4. 样本处理方案
4.1 细胞上清制备
分离大鼠脾淋巴细胞（密度梯度离心）
用含刺激剂的RPMI1640培养（5×10 cells/mL）
48小时后收集上清，0.22μm过滤
4.2 炎症组织处理
关节炎模型：关节腔冲洗液+蛋白酶抑制剂
结肠炎模型：结肠组织匀浆（1:9 w/v PBS）
4.3 保存条件
短期：4℃保存≤24小时
长期：-80℃分装（避免＞2次冻融）
5. 标准化操作流程
预实验准备
所有试剂平衡至室温（18-25℃）
配制标准品梯度：0、7.8、15.6、31.2、62.5、125、250、500pg/mL
关键步骤控制
孵育条件：37℃湿盒，避免震动
洗板程序：300μL/孔，浸泡30秒×5次
显色时间：室温精确控制10分钟（±30秒）
质量控制
每板设置：空白孔、零标准品、内部质控品
接受标准：质控品CV≤15%
6. 应用场景
自身免疫病研究：EAE（实验性自身免疫性脑脊髓炎）、CIA（胶原诱导性关节炎）
黏膜免疫：肠道Th17细胞应答
感染模型：金黄色葡萄球菌感染中的IL-17动态
药物筛选：IL-17A抑制剂药效评估
7. 注意事项
实验设计
推荐采样时间点：免疫后7-14天
阳性对照：ConA刺激的脾细胞上清
干扰控制
高IgG样本需Protein G预处理
数据分析
推荐曲线拟合：四参数逻辑（4PL）模型
异常值标准：超出标准曲线±20%
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