商品属性
产品名称 | 大鼠白细胞介素17A(IL-17A)ELISA试剂盒 | 英文名称 | RatIL-17A elisa kit |
检测范围 | 1.5625pg/mL-100pg/mL | 货号 | PR9062 |
检测原理
采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)
包被抗体:微孔板预包被抗大鼠IL-17A捕获抗体。
样本孵育:依次加入样本、标准品、HRP标记的检测抗体,温育后彻底洗涤。
显色反应:加入底物TMB,在过氧化物酶催化下产生蓝色→黄色(加酸终止)。
结果测定:450nm波长测定OD值,浓度与颜色深浅正相关,通过标准曲线计算样本浓度。

样本处理要求
适用于血清、血浆、细胞上清液、组织匀浆,处理方式如下:
| 样本类型 | 处理步骤 |
| 血清 | 无热原/内毒素试管收集,避免细胞刺激;3000 rpm离心10分钟分离血清 |
| 血浆 | EDTA/柠檬酸盐/肝素抗凝;3000 rpm离心30分钟取上清 |
| 细胞上清液| 3000 rpm离心10分钟去除颗粒 |
| 组织匀浆 | 生理盐水匀浆后,3000 rpm离心10分钟取上清 |
关键提示:组织样本需明确均质化方法,避免反复冻融影响蛋白活性。
试剂盒典型组成
预包被微孔板(48孔或96孔)
大鼠IL-17A标准品
HRP标记检测抗体
TMB显色底物液
终止液(酸性溶液)
洗涤缓冲液(浓缩液)
说明书 & 标准曲线坐标纸
操作注意事项
温育条件:需严格按说明书控制温度和时间(通常37℃, 30-60分钟)。
洗涤充分:避免非特异性结合导致假阳性,建议使用洗板机。
标准曲线:每次实验需同步绘制,建议复孔检测。
仪器校准:酶标仪需提前预热,450nm为主波长(参考波长570/630nm校正)。
数据解读示例
| 标准品浓度 (pg/mL) | 平均OD值 | 样本OD值 | 计算浓度 (pg/mL) |
| 0 | 0.05 | 0.32 | 85.2 |
| 50 | 0.18 | ... | ... |
| 100 | 0.35 | | |
注:超出标准曲线范围的样本需稀释后复测,结果乘以稀释倍数。
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关键字: 大鼠白细胞介素17A;IL-17A;ELISA试剂盒;