大鼠白细胞介素6(IL-6)elisa试剂盒
1. 检测原理
采用双抗体夹心ELISA技术，特异性识别大鼠IL-6单体（21kDa）和四螺旋束结构。预包被抗大鼠IL-6单抗（识别N端结构域）捕获样本中的IL-6，生物素标记的二抗（识别C端表位）通过链霉亲和素-HRP系统催化TMB显色，450nm吸光度值与IL-6浓度呈正相关。
产品名称 | 大鼠白细胞介素6(IL-6)elisa试剂盒 | 货号 | XG-R1524 |
英文名称 | Rat IL-6 ELISA Kit | 规格 | 48T\96T |
2. 核心组分
组分 规格 保存条件 关键特性
预包被板 96T 2-8℃（含干燥剂） 高亲和力（Kd=0.08nM）
重组标准品 0-2000pg/mL -20℃ 冻干粉，比活性≥1×10 U/mg
生物素-抗体 100μL -20℃（避光） 识别IL-6受体结合域
细胞刺激鸡尾酒 1mL -20℃ LPS（1μg/mL）+IL-1β（10ng/mL）
血清替代基质 15mL 4℃ 消除异嗜性抗体干扰
3. 性能参数
检测范围：15.6-1000pg/mL（可扩展至5000pg/mL）
灵敏度：4.3pg/mL（基于2.5SD空白值）
样本兼容性：
最佳：炎症模型血清（内毒素血症）
适用：脑脊液（需1:2稀释）、脂肪组织匀浆
交叉反应：
大鼠IL-6：100%
小鼠IL-6：78%
人IL-6：<0.01%
精密度：
批内CV：3.5-5.8%
批间CV：6.2-8.9%
4. 样本处理规范
4.1 炎症模型血清采集
LPS（5mg/kg）腹腔注射
6小时后心脏穿刺取血
4℃静置1小时后离心（2000×g，20分钟）
4.2 脂肪组织处理
取附睾脂肪垫100mg
加入900μL含1% Triton X-100的裂解液
超声破碎（冰浴，20kHz，3×10秒脉冲）
4.3 保存稳定性
血清：-80℃保存6个月（回收率>95%）
组织匀浆：液氮速冻后-80℃保存
5. 实验操作要点
标准曲线制备
梯度稀释：0、15.6、31.2、62.5、125、250、500、1000pg/mL
复溶液：含0.5% BSA的PBS
关键步骤控制
孵育条件：37℃恒温振荡（250rpm）
洗板液：含0.1% Tween-20的Tris-HCl（pH7.4）
显色终止：2N HCl（终止更彻底）
质控标准
空白OD值：<0.05
最高标准点OD值：≥2.0
钩状效应检测：样本稀释平行性试验
6. 主要应用方向
急性期反应：内毒素休克模型监测
代谢炎症：肥胖相关低度炎症
神经炎症：脑创伤后小胶质细胞激活
骨代谢研究：破骨细胞分化调控
7. 注意事项
实验设计
推荐采样时间：刺激后3-12小时（峰值窗口）
必须设置：正常对照、模型对照、处理组
干扰控制
避免使用溶血样本（Hb>0.2mg/mL）
高血脂样本需超离（12000×g，30分钟）
数据分析
推荐曲线拟合：五参数logistic模型
异常值标准：超出标准曲线±15%
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