大鼠白介素6(IL-6)ELISA试剂盒
产品简介:
大鼠白介素6(IL-6)ELISA试剂盒是专为定量检测大鼠血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆及其他生物液体中IL-6含量设计的科研试剂盒。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），具有高灵敏度、高特异性和良好的重复性，是炎症、免疫反应、肿瘤等基础研究常用的检测工具。
英文名称 | Rat IL-6 ELISA Kit | 产品类别 | Rat/大鼠Elisa试剂盒 |
货号 | A116447 | 规格 | 48T/96T |
灵敏度 | 12.5pg/mL | 检测范围 | 25pg/mL-800pg/mL |
核心原理
预包被抗大鼠IL-6抗体的微孔板，样本中的IL-6与抗体结合，再加入生物素化检测抗体和HRP标记的链霉亲和素，形成免疫复合物。洗涤后加入显色底物TMB，颜色深浅与IL-6浓度成正相关。nm波长下测定OD值，通过标准曲线计算浓度。
主要特点
检测范围广：通常为12.5-800pg/mL，灵敏度可达7.5pg/mL（不同品牌/批次有差异）。
高特异性：与其它细胞因子无交叉反应，准确检测大鼠IL-。
重复性好：板内、板间变异系数均小于10%，结果稳定可靠。
应用广泛：适用于大鼠IL-6在炎症、免疫调节、肿瘤、代谢、神经科学等领域的基础科研和药物研发。
操作流程简要
样本准备：血清、血浆、细胞上清等适当处理并稀释。
加样：标准品和样本加入微孔板，设空白对照。
温育：37℃孵育30-60分钟。
洗板：弃去液体，洗涤5次。
加检测抗体：生物素化抗IL-6抗体，37℃孵育30分钟。
加酶结合物：HRP标记链霉亲和素，37℃孵育30分钟。
显色与终止：TMB显色，加终止液。
读数：450nm测定OD值，计算IL-6浓度。
注意事项
避免反复冻融样本，不可检测含的样品。
试剂盒组分需按说明书规范使用和保存。
严格遵守操作步骤及仪器校准，确保结果准确。
如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：
稀释线性实验 (Linearity)：
操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。
预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test)：
操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。
预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。
回收实验 (Recovery Test)：
操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。
预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。
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注意事项
试剂盒组分应按说明储存，使用前平衡至室温。
实验中需避免交叉污染，建议使用一次性吸头。
充分混匀对实验结果至关重要。
试剂盒仅供研究使用，不可用于临床诊断。
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