大鼠核因子κB受体激活因子(RANk)elisa试剂盒一、核心检测参数
检测靶标:大鼠RANK/TNFRSF11A(膜结合型及可溶型)
检测原理:三明治ELISA(双表位识别技术)
动态范围:15-2000 pg/mL(4.5个数量级)
灵敏度:<5 pg/mL(可检测单个破骨前体细胞表达)
样本兼容性:
破骨细胞培养上清(推荐)
骨髓单核细胞裂解液
骨组织匀浆(需胶原酶消化)
血清/血浆(检测sRANK)
产品名称
大鼠核因子κB受体激活因子(RANk)elisa试剂盒
货号
XG-R1542
英文名称
Rat RANk ELISA Kit
规格
48T\96T
二、关键技术突破
抗体对特性:
捕获抗体:抗胞外区表位(Clone 12A5)
检测抗体:抗CRH结构域(HRP标记)
特异性控制:
不识别RANKL/OPG
与TRAIL受体无交叉反应
三、实验方案优化
破骨细胞诱导方案:
诱导条件 = RANKL(50ng/mL) + M-CSF(25ng/mL)
培养时间 = 5天(TRAP染色验证)
样本处理规范:
膜蛋白提取:
matlab
裂解缓冲液 = 含1% CHAPS的TBS
超速离心 = 100000×g,1h,4℃
血清处理:
采血后30min内离心(2000×g,15min)
避免使用肝素抗凝(影响RANKL结合)
四、质量控制系统
参数 验收标准
批内CV ≤7%
批间CV ≤12%
线性范围 85-115%
稳定性 24个月@-80℃
五、核心应用领域
骨代谢研究:
骨质疏松模型评估
骨转移瘤微环境分析
免疫调控:
树突状细胞成熟标志
乳腺发育研究
炎症性疾病:
类风湿关节炎滑膜破坏机制
牙周炎骨吸收监测
六、关键操作规范
特殊处理要求:
检测膜结合型需用含蛋白酶抑制剂的裂解液
避免样本反复冻融(≤2次)
信号检测系统:
TMB显色时间 = 10±0.5min(严格控制)
终止后检测窗口 = <15min
七、数据解读指南
生物学阈值:
样本类型 基础水平 激活水平
破骨细胞 50-200 pg/10细胞 >800 pg/10细胞
血清sRANK 100-400 pg/mL >1000 pg/mL
联合检测方案:
必检组合:RANK + RANKL + OPG
关键比值:RANKL/RANK(骨吸收指数)
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