商品属性
产品名称
大鼠核因子κB受体激活因子(RANk)ELISA试剂盒
英文名称
Rat RANk ELISA Kit
检测范围
0.156ng/mL-10ng/mL
货号
PR33407
用途:本试剂盒用于定量检测大鼠血清、血浆及相关液体样本中RANK的浓度,适用于科学研究用途。
实验原理
采用双抗体夹心法(Sandwich ELISA)。将纯化的大鼠RANK特异性抗体预包被于微孔板,形成固相抗体。加入待测样本后,样本中的RANK与固相抗体结合;随后加入酶标记的检测抗体,形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。经洗涤去除未结合物质后,加入底物TMB显色。TMB在辣根过氧化物酶(HRP)催化下产生蓝色产物,终止反应后转为黄色。颜色的深浅与样本中RANK浓度呈正相关,通过450 nm波长测定吸光度(OD值),结合标准曲线计算目标蛋白含量。
试剂盒组成
预包被微孔板:96孔(12条×8孔),含抗大鼠RANK抗体。
标准品:系列浓度RANK冻干粉或溶液(需复溶)。
酶标抗体:HRP标记的抗大鼠RANK抗体。
显色底物(TMB):避光保存。
终止液:酸性溶液(如2M H₂SO₄)。
洗涤缓冲液:20×浓缩液,需稀释使用。
样本稀释液:用于样本预处理。
封板膜:实验过程中覆盖微孔板。
操作步骤
标准品与样本准备:复溶标准品并梯度稀释;样本按需稀释。
加样:每孔加入标准品或样本,37℃孵育。
洗涤:弃液体,洗涤缓冲液洗板3-5次。
加酶标抗体:孵育后洗涤。
显色:加入TMB,避光反应,终止后测定OD值。
注意事项
试剂盒需在有效期内使用,避免反复冻融。
样本避免溶血或脂血,建议分装保存于-80℃。
操作时需佩戴防护用具,终止液具腐蚀性。
结果计算需以复孔平均值和标准曲线为准。
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