1. 检测原理
采用双抗体夹心ELISA技术，特异性识别大鼠MMP-1的活性形式（45kDa）和酶原形式（55kDa）。预包被抗大鼠MMP-1单抗（靶向催化结构域）捕获样本中的MMP-1，生物素标记的二抗（识别血红素结合结构域）通过链霉亲和素-HRP系统催化TMB显色，450nm吸光度值与MMP-1浓度正相关。
2. 核心组分
组分 规格 保存条件 关键特性
预包被板 96T 2-8℃（含干燥剂） 高亲和力单抗（Kd=0.18nM）
重组标准品 0-20ng/mL -80℃ 活化型MMP-1（含Zn2/Ca2）
组织保护液 15mL -20℃ 含EDTA/BB94抑制剂
血清处理液 10mL 4℃ 去除α2-巨球蛋白
酶原激活剂 0.5mL -20℃ APMA（1mM）
产品名称 | 大鼠基质金属蛋白酶1(MMP-1)elisa试剂盒 | 货号 | XG-R1548 |
英文名称 | Rat MMP-1 ELISA Kit | 规格 | 48T\96T |
3. 性能参数
检测范围：0.312-20ng/mL（可扩展至100ng/mL）
灵敏度：0.09ng/mL（基于2.5SD空白值）
样本兼容性：
最佳：关节炎滑膜组织匀浆
适用：血清（需1:5稀释）、创面渗出液
交叉反应：
大鼠MMP-1：100%
MMP-8：<0.5%
MMP-13：<0.1%
精密度：
批内CV：4.8-6.7%
批间CV：7.3-9.9%
4. 样本处理规范
4.1 组织处理
取50mg病变滑膜组织
加入450μL含保护液的Tris-HCl（pH7.6）
超声破碎（冰浴，20kHz，3×10秒脉冲）
4℃ 15000×g离心30分钟
4.2 血清处理
使用硅化采血管
采集后1小时内离心（3000×g，15min）
立即加入处理液（1:4体积比）
4.3 特殊处理
酶原激活：样本与激活剂37℃孵育1小时
活性检测：需用FRET底物验证
5. 实验操作要点
标准曲线制备
梯度稀释：0、0.312、0.625、1.25、2.5、5、10、20ng/mL
复溶液：含10mM CaCl的TBS
关键步骤控制
孵育条件：37℃恒温振荡（180rpm）
洗板液：含0.05% Tween-20的Hepes缓冲液
显色终止：2M HSO（终止更彻底）
质控标准
空白OD值：≤0.06
最低检测限回收率：90-110%
钩状效应检测：样本稀释线性试验
6. 主要应用方向
关节炎研究：胶原降解评估
创面愈合：肉芽组织MMP-1动态
心血管重塑：心肌梗死后基质重构
肿瘤转移：基质浸润能力分析
7. 注意事项
样本特殊性
避免反复冻融（酶活性损失）
组织样本需快速处理（采集后30分钟内）
干扰控制
含胎牛血清样本需透析处理
高脂样本需超速离心（10000×g，20min）
数据分析
推荐五参数logistic曲线拟合
组织数据需用总蛋白校正（ng/mg）
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