大鼠巨噬细胞炎性蛋白2α(MIP-2α)elisa试剂盒
1. 检测原理
采用双抗体夹心ELISA技术，特异性识别大鼠MIP-2α（8kDa）的保守ELR基序（谷氨酸-亮氨酸-精氨酸）。预包被抗大鼠CXCL2单抗（克隆号：MAB452）捕获样本中的MIP-2α，生物素标记的二抗通过链霉亲和素-HRP系统催化超敏TMB显色，450nm吸光度值与MIP-2α浓度呈正相关。
产品名称 | 大鼠巨噬细胞炎性蛋白2α(MIP-2α)elisa试剂盒 | 货号 | XG-R1564 |
英文名称 | RatMIP-2α ELISA Kit | 规格 | 48T\96T |
2. 核心组分
组分 规格 保存条件 关键特性
预包被板 96T 2-8℃（含干燥剂） 抗N端表位单抗
重组标准品 0-2000pg/mL -80℃ 活性二聚体（比活性≥1×10 U/mg）
炎症诱导剂 1mL -20℃ LPS（1mg/mL）+TNF-α（10μg/mL）
血浆稳定液 10mL 4℃ 含EDTA/肝素双抗凝
组织保护液 15mL -20℃ 含RNase抑制剂
3. 性能参数
检测范围：31.2-2000pg/mL（可扩展至8000pg/mL）
灵敏度：9.3pg/mL（基于2.5SD空白值）
样本兼容性：
最佳：急性肺炎症肺泡灌洗液
适用：血浆（肝素抗凝）、肝脏匀浆
交叉反应：
大鼠MIP-2α：100%
MIP-1α/1β：<0.1%
人CXCL1/CXCL8：<0.01%
精密度：
批内CV：5.8-7.4%
批间CV：8.6-10.2%
4. 样本处理规范
4.1 肺泡灌洗液采集
气管插管注入3mL冷PBS
轻柔抽吸3次，回收率≥80%
4℃ 500×g离心10分钟去除细胞
4.2 肝组织处理
取左叶50mg
加入450μL含保护液的PBS
珠磨仪匀浆（4℃，30Hz，30秒）
12000×g离心20分钟（4℃）
4.3 特殊处理
血浆：采集后立即加入稳定剂（1:9）
细胞培养：无血清刺激6-24小时
5. 实验操作要点
标准曲线制备
梯度稀释：0、31.2、62.5、125、250、500、1000、2000pg/mL
复溶液：含0.1% HSA的PBS
关键步骤控制
孵育条件：37℃恒温振荡（200rpm）
洗板液：含0.01% Proclin 300的TBS
显色时间：精确控制10±0.5分钟
质控标准
空白OD值：≤0.08
最低检测限：≥25pg/mL
LPS刺激阳性对照：≥800pg/mL
6. 主要应用方向
急性肺损伤：中性粒细胞浸润评估
肝纤维化：Kupffer细胞活化监测
脓毒症模型：细胞因子风暴分析
创伤修复：炎症-再生转化研究
7. 注意事项
实验设计
推荐采样时间：刺激后6-48小时
必须设置：生理盐水灌洗对照
干扰控制
避免使用EDTA血浆（螯合Zn2影响结构）
高粘稠样本需DNase I处理
数据分析
推荐五参数logistic曲线拟合
灌洗液数据需用总蛋白校正
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