商品属性
产品名称 | 小鼠甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Mouse AFP elisa kit |
检测范围 | 0.1875ng/mL-12ng/mL | 货号 | PM18628 |
产品概述
本试剂盒用于定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清液中的甲胎蛋白(AFP),采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA),具有高灵敏度(最低检出限59pg/ml)和强特异性,与小鼠瘦素、抵抗素等无交叉反应,板内及板间变异系数均小于10%。AFP是一种胎儿及肿瘤相关蛋白,分子量约66-72kDa,可作为癌症及发育异常的标志物。


试剂盒组成
96孔配置:12孔×8条微孔板(预包被AFP单抗)
48孔配置:12孔×4条微孔板
标准品:100ng/ml(需梯度稀释至0-40IU/ml)
浓缩清洗液:30ml(需1:30稀释至870ml蒸馏水)
生物素标记抗体、链霉亲和素-HRP、底物A/B
检测原理
包被抗体结合:样品中的AFP与预包被的单抗结合。
生物素标记抗体结合:加入生物素标记的二抗,形成复合物。
酶显色反应:通过链霉亲和素-HRP催化底物显色,颜色深度与AFP浓度正相关。
操作步骤
试剂准备
所有试剂需平衡至室温(18-25℃)。
稀释清洗液:30ml浓缩液加870ml蒸馏水。
标准品稀释(以40IU/ml为例):
标准品F(40IU/ml)加0.6ml稀释液混匀,依次梯度稀释至A管(0IU/ml)、B管(2.5IU/ml)等。
加样与温育
分别加入标准品、质控品及待测样本至对应孔,避免交叉污染。
37℃温育后洗涤,依次加入生物素抗体、链霉亲和素-HRP及底物。
终止与检测
加入终止液后,450nm波长测定OD值,绘制标准曲线计算浓度。
注意事项
标准品稀释后需尽快使用,避免反复冻融。
不同批号试剂不可混用,避免底物接触金属离子。
实验废弃物需按生物危害规范处理。
储存条件
未开封试剂盒2-8℃保存,有效期12个月;开封后标准品及酶标板需-20℃保存。
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关键字: 小鼠甲胎蛋白;AFP;ELISA试剂盒;
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