大鼠甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒

商品属性

检测目的

本试剂盒用于定量检测大鼠血清、血浆或组织样本中的甲胎蛋白（AFP）含量，适用于科研实验。

实验原理

采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）：

固相抗体：微孔板预包被抗大鼠AFP抗体。

抗原结合：样本中的AFP与固相抗体结合后，加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

显色反应：洗涤后加入底物TMB，在HRP催化下产生蓝色产物，酸化后转为黄色，颜色深度与样本中AFP浓度正相关。

定量分析：在450 nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算AFP浓度。

试剂盒组成

48孔配置与96孔配置可选，主要组分包括：

酶标包被板（1×48或1×96孔）

AFP标准品（400 μg/L，需按说明书稀释）

HRP标记抗体、TMB显色液、终止液

封板膜、密封袋

说明书（含标准曲线制备方法）

样本要求

样本类型：血清、血浆或组织匀浆液（避免溶血或反复冻融）。

保存条件：2-8℃短期保存，长期储存需≤-20℃。

操作步骤概要

标准品稀释：按梯度稀释标准品（建议设5-7个浓度点）。

加样与孵育：每孔加入样本或标准品，37℃孵育1-2小时。

洗涤：去除未结合物，加入酶标抗体孵育。

显色与终止：加入TMB避光反应15-30分钟，终止液终止反应。

检测：酶标仪读取450 nm吸光度，绘制标准曲线并计算浓度。

注意事项

试剂盒需2-8℃保存，避免反复冻融。

实验前平衡所有组分至室温（20-25℃）。

不同批次试剂不可混用，建议重复测定以确保准确性。

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