商品属性
产品名称 | 大鼠软骨寡聚基质蛋白(COMP)ELISA试剂盒 | 英文名称 | RatCOMP elisa kit |
检测范围 | 0.125ng/mL-8ng/mL | 货号 | PR10031 |
预期用途
本试剂盒采用酶联免疫吸附法（ELISA），定量检测大鼠血清、血浆、细胞培养上清液或其他生物液体中的软骨寡聚基质蛋白（COMP）含量，适用于体外研究。
实验原理
双抗体夹心法：
微孔板预包被抗大鼠COMP抗体，形成固相载体。
加入样本或标准品后，COMP与固相抗体结合，再依次加入生物素化抗COMP抗体、辣根过氧化物酶（HRP）标记的亲和素，形成抗体-抗原-酶标复合物。
经洗涤后，加入底物TMB显色，在HRP催化下产生蓝色产物，酸性终止液使其转为黄色。
450 nm波长下测定吸光度（OD值），OD值与COMP浓度呈正相关，通过标准曲线计算样本浓度。
检测范围：
典型检测范围为0.2–8 μg/L。
试剂盒组成
酶标板：96孔（预包被抗体）。
标准品：冻干粉2瓶（80 ng/ml或1000 ng/瓶），需用配套稀释液复溶后梯度稀释（如20 ng/ml、10 ng/ml等）。
生物素化抗体工作液：12 ml。
HRP标记亲和素/酶标抗体：12 ml。
TMB底物溶液：12 ml。
终止液（硫酸溶液）：12 ml。
浓缩洗涤液（20×）：50 ml，需按比例稀释后使用。
样本稀释液：12 ml（用于标准品及样本稀释）。
操作步骤
标准品制备：复溶后梯度稀释至所需浓度（如20–0.312 ng/ml），避免在酶标板中直接稀释。
加样与孵育：
每孔加入样本或标准品100 μl，37℃孵育90分钟。
洗涤后加入生物素化抗体，37℃孵育60分钟。
显色与终止：
加入TMB底物避光显色15–30分钟，终止后30分钟内测定OD值。
注意事项
试剂盒需2–8℃保存，复溶后的标准品需15分钟内使用。
避免反复冻融样本，高浓度样本需用稀释液预稀释。
操作时需佩戴防护用具，终止液具腐蚀性。
结果计算
以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过四参数拟合方程计算样本浓度。
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