商品属性
产品名称 | 人软骨寡聚基质蛋白(COMP)ELISA试剂盒 | 英文名称 | human COMP elisa kit |
检测范围 | 31.25ng/mL-2000ng/mL | 货号 | PH26127 |
预期用途
本试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆、细胞培养上清液或其他生物体液中的软骨寡聚基质蛋白（COMP）含量，适用于科研用途。
实验原理
采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ABC-ELISA）。将抗人COMP单克隆抗体包被于微孔板，样本中的COMP与固相抗体结合后，依次加入生物素化抗人COMP抗体和辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，形成复合物。加入TMB底物显色，在过氧化物酶催化下产生蓝色产物，酸化后转为黄色。450 nm波长下测定吸光度（OD值），COMP浓度与OD值呈正比，通过标准曲线计算样本浓度。
试剂盒组成（2–8℃保存）
预包被酶标板：96孔（抗人COMP单抗包被）。
标准品：2瓶冻干粉（10000 ng/瓶或60 ng/ml初始浓度），临用前需用稀释液重构并梯度稀释（如60 ng/ml至0.94 ng/ml系列）。
酶标抗体工作液：12 mL（生物素化抗人COMP抗体）。
标本稀释液：12 mL（10×浓缩液，需稀释后使用）。
洗涤缓冲液：50 mL（20×浓缩液，使用时按比例稀释）。
TMB底物工作液：避光保存，显色用。
终止液（未明确提及但常规含1M硫酸）。
操作步骤概要
标准品制备：冻干标准品用稀释液重构，静置10分钟后混匀，梯度稀释至所需浓度（避免孔内直接稀释）。
加样：依次加入标准品或样本、生物素化抗体、HRP标记亲和素，每步后充分洗涤。
显色：加入TMB底物，避光反应后终止，450 nm测OD值。
计算：以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制曲线，拟合方程计算样本浓度。
注意事项
试剂盒需在有效期内使用，避免反复冻融标准品或样本。
洗涤步骤需彻底，避免交叉污染。
显色时间需严格控制，终止后30分钟内完成检测。
储存及有效期
未开封试剂盒2–8℃保存，有效期见外包装；开封后组分按标签要求储存（如酶标抗体需避光）。
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