商品属性
产品名称 | 小鼠核因子κB受体活化因子（RANK）ELISA试剂盒 | 英文名称 | Mouse RANK elisa kit |
检测范围 | 0.15625ng/mL-10ng/mL | 货号 | PM15664 |
预期用途
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法，定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清等样本中的RANK浓度，仅供科研使用，不适用于临床诊断。
实验原理
包被：抗小鼠RANK单克隆抗体预包被于96孔板。
结合：样本中的RANK与包被抗体结合，形成固相复合物。
检测：依次加入生物素化检测抗体、辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，形成“抗体-抗原-抗体-酶”复合物。
显色：加入TMB底物后，在HRP催化下显蓝色，终止反应后转为黄色，OD450 nm吸光度与RANK浓度呈正比。
试剂盒组成
| 组分 | 规格/数量 | 保存条件 |
| 预包被酶标板 | 96孔（可拆卸） | 2–8℃干燥保存 |
| RANK标准品（冻干） | 2瓶（4,000 pg/mL）| -20℃ |
| 生物素化检测抗体 | 1瓶（120 μL） | -20℃避光 |
| HRP-链霉亲和素 | 1瓶（120 μL） | -20℃避光 |
| 显色液（TMB） | A/B液各6 mL | 2–8℃避光 |
| 20×浓缩洗涤缓冲液 | 25 mL | 室温 |
| 终止液（2M H₂SO₄） | 6 mL | 室温 |
样本处理
血清/血浆：采集后离心去除颗粒物，-20℃分装保存，避免反复冻融。
细胞上清：离心去除沉淀后检测。
标准曲线范围
梯度稀释标准品至以下浓度：
2,000 pg/mL、1,000 pg/mL、500 pg/mL、250 pg/mL、125 pg/mL、62.5 pg/mL、31.25 pg/mL，零孔为样本稀释液。
操作步骤
复温：试剂盒室温平衡30分钟。
稀释：用样本稀释液重建标准品，系列稀释后加入对应孔（50 μL/孔）。
加样：待测样本10 μL + 稀释液40 μL（1:5稀释），混匀后加至样本孔。
孵育：37℃反应60分钟，洗板5次。
显色：依次加入检测抗体、酶结合物、TMB，避光反应15分钟，终止后30分钟内检测OD值。
注意事项
避免试剂接触金属离子或氧化剂。
不同批次组分不可混用。
显色时间需严格控制，避免过度反应。
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关键字： 小鼠核因子κB受体活化因子;RANK;ELISA试剂盒;
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