检测原理
采用双抗体夹心法,通过包被抗IL-27抗体捕获样本中的目标蛋白,再结合酶标二抗与底物显色,定量检测人血清、血浆或细胞培养上清中的IL-27浓度。
规格:48T/96T
保存条件:2-8℃避光保存,有效期6个月
产品名称
人白介素27(IL-27)ELISA试剂盒
英文名称
Human IL-27 ELISA Kit
分类
Human/人Elisa试剂盒
检测范围
62.5pg/mL-2000pg/mL
灵敏度
31.25pg/mL
货号
PH33019
试剂盒组成
预包被微孔板
IL-27标准品(梯度浓度)
样本稀释液
HRP标记检测抗体
洗涤缓冲液(10×浓缩液)
底物A/B
终止液
封板膜
操作步骤
样本准备:
血清/血浆需离心去除颗粒物,细胞上清需过滤澄清。
样本建议分装保存于-20℃或-80℃,避免反复冻融。
试剂平衡:
所有组分使用前需室温平衡20-30分钟。
加样与孵育:
标准品孔:加入50μL不同浓度标准品。
样本孔:先加10μL待测样本,再加40μL稀释液(空白孔仅加稀释液)。
每孔加入100μL HRP标记抗体,37℃孵育60分钟。
洗涤:
弃去液体,每孔加满洗涤液,静置1分钟后弃去,重复5次。
显色与终止:
每孔加入底物A/B各50μL,37℃避光反应15分钟。
加入50μL终止液,颜色由蓝变黄。
检测:
450nm波长下读取OD值,根据标准曲线计算样本浓度。
注意事项
不同批次试剂不可混用。
洗涤需彻底,避免交叉污染。
显色时间需严格控制,终止后15分钟内完成检测。
技术参数
检测范围:通常为15.6-1000 pg/mL。
灵敏度:<5 pg/mL。
精密度:板内变异系数<10%,板间<15%。
适用仪器
酶标仪(450nm滤光片)。
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