商品属性
产品名称 | 人黄体生成素(LH)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Human LH ELISA Kit |
检测范围 | 1U/L-64U/L | 货号 | PH32943 |
产品用途
本试剂盒用于定量检测人血清、血浆或相关液体样本中黄体生成素(LH)的含量,适用于科学研究,不可用于临床诊断。
实验原理
采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。微孔板预包被抗LH抗体,加入样本或标准品后,LH与固相抗体结合,再与HRP标记的检测抗体形成复合物。经洗涤后加入底物TMB显色,在过氧化物酶催化下产生蓝色产物,酸性终止后转为黄色。450nm波长下测定吸光度(OD值),浓度与OD值呈正相关,通过标准曲线计算样本浓度。


试剂盒组成
预包被微孔板:96孔或48孔(根据配置)。
标准品:冻干粉或液体形式(浓度范围1.56–100 ng/mL或72 mIU/mL,需临用前稀释)。
样本稀释液:1×20 mL。
检测抗体:HRP标记,含稀释液A/B各10 mL。
TMB显色液、终止液及洗涤缓冲液(需自备或按说明配制)。
封板膜、密封袋及说明书。
样本处理
血清:无菌采血后3000 rpm离心10分钟,避免溶血。
血浆:EDTA/肝素抗凝,3000 rpm离心30分钟取上清。
细胞上清液:离心去除颗粒物。样本需分装保存于-20℃或-80℃,避免反复冻融。
操作步骤
标准品梯度稀释(如100 ng/mL起始,倍比稀释至1.56 ng/mL)。
加样:每孔加入样本或标准品50 μL,37℃孵育30分钟。
洗涤:弃液后加洗涤液洗板5次。
加酶标抗体50 μL,37℃孵育30分钟,再次洗涤。
加TMB显色液50 μL,避光反应15分钟,终止后30分钟内读数。
结果计算
以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线,拟合方程计算样本浓度。
注意事项
试剂盒保存于2–8℃,复溶后标准品需立即使用。
避免交叉污染,不同批次试剂不可混用。
显色时间及温度需严格控制,终止后颜色不稳定。
性能参数
检测范围:1.56–100 ng/mL)。
灵敏度:通常≤1.0 ng/mL。
批内/批间变异系数:<10%和<15%。
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