产品名称
小鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)ELISA试剂盒
英文名称
Mouse MIF ELISA Kit
分类
Mouse/小鼠Elisa试剂盒
检测范围
31.25pg/mL-1000pg/mL
灵敏度
15.625pg/mL
货号
PM33044
用途
本试剂盒用于定量检测小鼠血清、血浆、细胞培养上清液或其他生物液体样本中的MIF浓度,适用于科研用途。
实验原理
采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA):
包被抗体:抗小鼠MIF单克隆抗体预包被于微孔板,形成固相抗体。
样本孵育:加入待测样本或标准品,样本中的MIF与固相抗体结合。
酶标抗体:加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗小鼠MIF二抗,形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。
显色反应:洗涤后加入TMB底物,在HRP催化下产生蓝色产物,酸性终止液终止反应后转为黄色。
定量分析:450 nm波长下测定OD值,通过标准曲线计算样本中MIF浓度。
试剂盒组成
(注:以下为常见组分,具体以实际包装清单为准)
预包被微孔板
小鼠MIF标准品(浓度梯度)
HRP标记检测抗体
TMB显色液、终止液
洗涤缓冲液(浓缩液或即用型)
封板膜、说明书
操作步骤
标准品稀释:按说明书梯度稀释。
加样孵育:每孔加入样本或标准品,37℃孵育1小时。
洗涤:弃液后洗涤3次。
加酶标抗体:37℃孵育30分钟,再次洗涤。
显色与终止:加入TMB避光显色15分钟,终止反应。
检测:450 nm读取OD值,绘制标准曲线并计算浓度。
注意事项
不同批次试剂不可混用。
样本避免反复冻融,离心去除沉淀。
显色时间需严格控制,避免过度反应。
操作时需佩戴防护用具,终止液为酸性腐蚀性液体。
技术参数
检测范围:通常为15.6–1000 pg/mL(具体范围以实际说明书为准)。
灵敏度:≤5 pg/mL。
特异性:不与小鼠其他细胞因子交叉反应。
重复性:板内、板间变异系数均<10%。
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