大鼠神经特异性烯醇化酶(NSE)elisa试剂盒
1. 检测原理
采用双抗体夹心ELISA技术，特异性识别大鼠NSE的γ-γ同源二聚体（78kDa）。预包被抗大鼠NSE单抗（克隆号：NES01）捕获样本中的NSE，生物素标记的二抗通过链霉亲和素-HRP系统催化超敏TMB显色，450nm吸光度值与NSE浓度呈正相关。
2. 核心组分
组分 规格 保存条件 关键特性
预包被板 96T 2-8℃（含干燥剂） 高亲和力单抗（Kd=0.08nM）
重组标准品 0-100ng/mL -80℃ 纯化大鼠脑提取物（ISO 17511标准）
脑脊液保护液 10mL -20℃ 含抗氧化剂复合物
溶血阻断剂 5mL 4℃ 消除红细胞干扰
神经元裂解液 15mL 4℃ 含1% CHAPS去垢剂
产品名称 | 大鼠神经特异性烯醇化酶(NSE)elisa试剂盒 | 货号 | XG-R1580 |
英文名称 | Rat NSE ELISA Kit | 规格 | 48T\96T |
3. 性能参数
检测范围：0.5-50ng/mL（可扩展至200ng/mL）
灵敏度：0.12ng/mL（基于3SD空白值）
样本兼容性：
最佳：脑脊液（腰椎穿刺获取）
适用：血清（需1:5稀释）、海马组织匀浆
交叉反应：
大鼠NSE：100%
非神经元烯醇化酶（αα/αγ）：<0.01%
人NSE：15%（种属交叉）
精密度：
批内CV：4.2-6.5%
批间CV：7.8-9.6%
4. 样本处理规范
4.1 脑脊液采集
大鼠枕大池穿刺取100μL CSF
立即加入等体积保护液
4℃ 10000×g离心15分钟
4.2 脑组织处理
快速分离海马体（冰上操作）
按1:9（w/v）加入冷裂解液
超声破碎（冰浴，10kHz，3×5秒）
4℃ 15000×g离心30分钟
4.3 血清特殊处理
采集后1小时内离心（3000×g，15min）
溶血样本需加2倍体积阻断剂
-80℃分装保存（≤2次冻融）
5. 实验操作要点
标准曲线制备
梯度稀释：0、0.5、1、2.5、5、10、25、50ng/mL
复溶液：含5mM Mg2的Tris-HCl（pH7.4）
关键步骤控制
孵育条件：37℃恒温振荡（200rpm）
洗板液：含0.02% Proclin 300的PBS
显色终止：1M HPO（终止更彻底）
质控标准
空白OD值：≤0.05
最低检测限：≥0.5ng/mL
脑损伤阳性对照：≥15ng/mL
6. 主要应用方向
脑损伤评估：缺血缺氧性脑病分级
神经退行性疾病：AD/PD模型神经元损伤
神经肿瘤：胶质瘤浸润程度监测
心脏骤停：脑复苏预后判断
7. 注意事项
实验设计
推荐采样时间：损伤后6-72小时
必须设置：假手术对照组
干扰控制
避免使用溶血样本（Hb>0.1mg/mL）
高脂样本需超速离心（12000×g，20min）
数据分析
推荐五参数logistic曲线拟合
脑脊液数据需用总蛋白校正
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