大鼠同线蛋白2(ST2)elisa试剂盒
一、核心检测信息
1. 检测原理
采用双抗体夹心ELISA技术，特异性识别大鼠ST2的两种亚型：
可溶型（sST2）：检测范围0.1-50ng/mL（识别IgG-Fc融合蛋白结构域）
膜结合型（ST2L）：需先用蛋白酶K处理样本（识别胞外区）
预包被抗大鼠ST2单抗（克隆号：RMST2-1）捕获目标蛋白，生物素标记的二抗通过链霉亲和素-HRP系统催化超敏TMB显色。
产品名称 | 大鼠同线蛋白2(ST2)elisa试剂盒 | 货号 | XG-R1588 |
英文名称 | RatST2 ELISA Kit | 规格 | 48T\96T |
2. 核心组分
组分 规格 保存条件 关键特性
预包被板 96T 2-8℃（含干燥剂） 高亲和力单抗（Kd=0.15nM）
重组标准品 0-50ng/mL -80℃ 含sST2和ST2L混合标准
心肌裂解液 20mL -20℃ 含蛋白酶抑制剂鸡尾酒
血清转化液 5mL 4℃ 含1mM PMSF
IL-33刺激剂 0.5mL -20℃ 重组大鼠IL-33（10μg/mL）
性能参数
检测范围：
sST2：0.1-50ng/mL（可扩展至200ng/mL）
ST2L：需额外蛋白酶处理（检测下限0.5ng/mL）
灵敏度：0.04ng/mL（基于2.5SD空白值）
样本兼容性：
最佳：心肌梗死边缘区组织
适用：血清（避免溶血）、支气管肺泡灌洗液
交叉反应：
大鼠ST2：100%
IL-1R/IL-18R：<0.01%
人ST2：8%（识别保守表位）
精密度：
批内CV：5.8-7.2%
批间CV：8.9-11.3%
样本处理规范
4.1 心肌组织处理
取梗死边缘区50mg
加入450μL冷裂解液
珠磨仪匀浆（4℃，40Hz，30秒）
4℃ 15000×g离心30分钟
4.2 ST2L检测处理
组织匀浆加入蛋白酶K（终浓度50μg/mL）
37℃消化1小时后立即冰浴终止
加入5mM EDTA抑制残余酶活
4.3 血清采集
使用硅化真空采血管
室温凝固30分钟后离心（2000×g，15min）
分装后-80℃保存（≤3次冻融）
实验操作要点
标准曲线制备
梯度稀释：0、0.1、0.5、1、5、10、25、50ng/mL
复溶液：含0.1% BSA的PBS（pH7.2）
关键步骤控制
孵育条件：37℃恒温振荡（200rpm）
洗板液：含0.02% Tween-20的TBS
显色终止：2M HSO（终止更彻底）
质控标准
空白OD值：≤0.08
IL-33刺激阳性对照：≥20ng/mL
稀释线性：80-120%回收率
主要应用方向
心血管疾病：心肌纤维化预后评估
哮喘模型：Th2型炎症监测
器官移植：排斥反应早期预警
肿瘤微环境：髓系抑制细胞研究
注意事项
实验设计
推荐同步检测IL-33（ST2配体）
必须设置：假手术组/正常对照组
干扰控制
避免使用EDTA血浆（影响蛋白酶处理）
溶血样本需超速离心（12000×g，15min）
数据分析
推荐五参数logistic曲线拟合
心肌数据需用总蛋白校正（ng/mg）
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