一、核心检测信息
检测目标
特异性定量大鼠血清、血浆、组织匀浆(如肿瘤、缺血心肌)或细胞培养上清中的 VEGF-A,一种由缺氧诱导因子(HIF-1α)调控的内皮细胞有丝分裂原,通过结合VEGFR-1/2受体促进血管新生,在缺血性疾病、肿瘤微环境及伤口修复中起核心作用。
产品名称 | 大鼠血管内皮细胞生长因子(VEGF-A)elisa试剂盒 | 货号 | XG-R1601 |
英文名称 | Rat VEGF-A ELISA Kit | 规格 | 48T\96T |
检测原理
双抗体夹心ELISA:
预包被抗大鼠VEGF-A单抗(靶向肝素结合域)捕获目标蛋白 → 生物素标记二抗(识别受体结合域)结合 → 超敏HRP-TMB显色系统(450nm/570nm双波长)。
亚型区分:可选择性检测VEGF-A164(主要活性形式)或VEGF-A120(可溶性形式)。
二、技术参数与验证
关键指标 技术说明
检测范围 10-2000 pg/mL(覆盖生理至病理浓度)
最低检测限 3 pg/mL(可检测微环境变化)
样本兼容性 血清(避免反复冻融)、肿瘤组织裂解液(含1% Triton X-100)、缺氧细胞上清(需除氧保存)
亚型特异性 与VEGF-B/C/D交叉反应<0.1%
动态范围 线性相关系数R2>0.995
三、典型应用场景
肿瘤血管生成
肝癌移植瘤模型中VEGF-A动态变化与微血管密度(CD31染色)的相关性
缺血性疾病
心肌梗死边缘区VEGF-A上调与侧支循环建立的时序分析
药物研发
抗VEGF抗体(如贝伐珠单抗)对大鼠视网膜病变的抑制效价评估
四、操作关键要点
样本处理
肿瘤组织:液氮速冻后需用含蛋白酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解
缺氧样本:需在厌氧工作站(1% O2)中处理,避免复氧导致假性降低
实验优化
高浓度样本需1:10稀释(使用含0.1% BSA的PBS)
每板设置缺氧阳性对照(CoCl2处理细胞上清)
质控要求:
每板需包含:空白孔、Hook效应对照(5 ng/mL)、跨板CV<7%
注意事项
生理波动
运动后大鼠血清VEGF-A可升高2-3倍(需统一静息状态采样)
联合检测建议
推荐与PDGF-BB、Ang-2联检评估血管成熟度
样本保存
组织提取液-80℃分装(冻融≤1次),避免反复冻融导致二聚体解离
公司正在出售的产品:
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