大鼠血管内皮生长因子(VEGF)elisa试剂盒
一、核心检测信息
一、实验原理
主要采用双抗体夹心法或竞争法：
双抗体夹心法（主流方法）：
酶标板预包被抗VEGF单克隆抗体，样本中的VEGF与抗体结合。
加入生物素化检测抗体及HRP标记的链霉亲和素，形成免疫复合物。
通过TMB显色反应，450 nm波长下测定吸光度，浓度与吸光度成正比。
竞争法（少数品牌）：
样本VEGF与标记抗原竞争结合抗体，显色后吸光度与浓度负相关。
产品名称 | 大鼠血管内皮生长因子(VEGF)elisa试剂盒 | 货号 | XG-R1600 |
英文名称 | Rat VEGF ELISA Kit | 规格 | 48T\96T |
关键性能参数
参数 典型范围/值 来源
检测范围 10-2500 pg/mL（因品牌而异）
灵敏度 3.86-12.43 pg/mL（最低检出量）
精密度 板内CV 3.1%-10%，板间CV 2.5%-15%
特异性 与GDNF、TNF-α等无交叉反应
重复性 批内/批间变异系数＜10%/15%
试剂盒组成
核心组分：预包被抗体酶标板、标准品、生物素化检测抗体、HRP标记链霉亲和素、TMB底物、终止液、洗涤缓冲液。
辅助材料：封板膜、样本稀释液、说明书。
四、样本处理与要求
适用样本：血清、血浆（EDTA/肝素抗凝）、细胞培养上清、组织匀浆液。
处理步骤：
血清/血浆：离心分离（1000×g，15-20分钟），避免反复冻融。
组织匀浆：PBS清洗后匀浆，超声破碎或冻融裂解，离心取上清。
细胞培养上清：直接离心去除杂质。
注意事项：
溶血样本不可用（影响HRP活性）。
高浓度样本需稀释（推荐2-5倍）。
五、操作流程（以双抗体夹心法为例）
加样：标准品与样本各50-100 μL至预包被孔中。
孵育：37℃温育1-2小时。
洗涤：PBST洗板5次。
加酶标抗体：HRP标记抗体100 μL，孵育1小时。
显色：TMB底物显色15分钟，终止液终止反应。
测定：450 nm测OD值，绘制标准曲线计算浓度。
注意事项
试剂保存：未开封试剂盒2-8℃保存，标准品-20℃分装。
操作规范：
避免孔板干燥，洗板需彻底（5次以上）。
建议使用复孔（至少双孔）减少误差。
质量控制：设置空白孔、标准曲线孔及内标孔。
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