人穿孔素1(PRF1)elisa试剂盒

1. 产品核心价值

靶标特性：

溶细胞效应关键蛋白（67kDa，钙依赖性）

细胞毒性T细胞（CTL）和NK细胞活性标志物

技术突破点： ? 特异性识别活性构象（非前体形式） ? 可检测膜结合型与分泌型PRF1

 2. 纳米级检测系统

核心组分  技术参数  创新设计

捕获抗体  抗PRF1构象抗体（克隆2D8）  识别钙结合结构域

检测抗体  金纳米颗粒标记抗体  表面等离子共振增强

标准品  活性PRF1（含Ca2?稳定剂）  NIBSC标准溯源

反应板  钙离子涂层板  维持蛋白活性构象

检测系统  多功能酶标仪（吸光+荧光）  双信号验证

3. 动态检测机制

graph TB

A[样本PRF1] --> B(钙依赖性捕获)

B --> C(纳米金标记)

C --> D{LSPR检测}

D --> E[550nm吸光度]

D --> F[680nm荧光]

4. 前沿应用方向

免疫治疗监测：

CAR-T细胞杀伤效能评估

免疫检查点抑制剂疗效预测

自身免疫病：

噬血细胞综合征（HLH）诊断

移植物抗宿主病（GVHD）预警

感染免疫：

慢性病毒感染（HBV/HIV）免疫耗竭评估

胞内病原体清除能力检测

5. 超敏性能参数

指标  本试剂盒  常规ELISA

灵敏度  0.05 ng/mL  1 ng/mL

动态范围  0.1-200 ng/mL  2-500 ng/mL

活性检测  仅识别钙结合态  总蛋白检测

检测时间  75分钟  4小时

样本类型  活细胞上清+裂解液  仅裂解液

6. 专业实验方案

样本处理规范：

细胞培养上清：含2mM CaCl?收集

细胞裂解液：含蛋白酶抑制剂+1mM Ca2?

标准曲线设置：

python

对数稀释梯度（R2≥0.99）

std = [200, 100, 50, 25, 12.5, 6.25, 3.125, 0] ng/mL

活性控制：

阳性对照：PMA刺激的PBMC上清

阴性对照：EGTA处理样本

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