产品简介:

人穿孔蛋白1(PRF1)ELISA试剂盒用于定量检测人血清、血浆或其他生物样本中的穿孔蛋白1(PRF1)水平。PRF1是一种由细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)和自然杀伤(NK)细胞产生的关键细胞溶质蛋白,参与免疫监视和免疫防御,通过在靶细胞膜上形成多聚穿孔通道,诱导靶细胞凋亡,从而清除病毒感染细胞或肿瘤细胞。
产品名称 | 人穿孔蛋白1(PRF1)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Human PRF1 ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A113960 |
检测原理
采用双抗体夹心法ELISA技术,微孔板包被抗PRF1抗体,样本中的PRF1与之结合后,加入生物素化的抗PRF1检测抗体及HRP标记的链霉亲和素,形成“捕获抗体-PRF1-检测抗体”复合物。通过TMB底物显色,颜色深浅与PRF1浓度成正比。

主要组成

预包被抗PRF1抗体的酶标板
PRF1标准品(不同浓度梯度)
生物素化的抗PRF1检测抗体
HRP标记的链霉亲和素
洗涤液、底物溶液(如TMB)、终止液等
3. 检测样本
人血清、血浆(EDTA/肝素抗凝),也可用于细胞培养上清、组织匀浆等样本。
4. 用途
肿瘤免疫研究:PRF1在肿瘤免疫逃逸和免疫治疗中的作用研究,评估免疫细胞的细胞毒性能力。
感染性疾病研究:研究机体在应对病毒感染时的特异性免疫应答。
自身免疫性疾病研究:探讨PRF1在自身免疫性疾病及免疫失调中的发病机制。
操作步骤

加样:加入标准品、样本及试剂。
温育:促进抗原抗体反应。
洗涤:去除未结合成分。
显色:加入底物观察颜色变化。
终止反应并读数:通过酶标仪测定吸光度(OD值),根据标准曲线计算PRF1浓度。
注意事项

严格按照说明书操作,避免交叉污染。
试剂需平衡至室温后使用,样本应避免反复冻融。
实验过程中需设置标准曲线及对照以确保结果准确性。
该试剂盒具有高灵敏度(通常可检测低至0.47-1.0 ng/mL)、良好的特异性和重复性,操作简便,广泛应用于肿瘤免疫、感染性疾病、自身免疫性疾病等相关领域的研究,为相关疾病的机制研究和治疗策略开发提供重要支持。
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常见问题与避坑指南:

环节 风险点 避坑建议
试剂使用 混用 严禁混用不同品牌或不同批号的试剂盒组分(如A品牌的包被板+B品牌的酶标二抗),这会导致反应体系崩溃。
终止反应 顺序 加入终止液后,溶液由蓝变黄。此时应尽快读数,因为颜色可能会随时间轻微变化。
保存 剩余板条 未用完的酶标板条,需立即密封,放入自封袋中并加干燥剂,保存于 2-8℃,避免受潮和反复冻融。
环境 污染 避免试剂接触漂白剂或含漂白剂的物质,它们会破坏酶的活性,导致实验失败。
建议:
在购买前,务必查看说明书中的“交叉反应”列表和“样本类型”说明。如果说明书宣称特异性极高(如CR0.1%),
但在你的实际样本中出现了大量假阳性,那可能需要优化洗涤步骤,或者考虑更换抗体特异性更强的试剂盒。
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