兔Apolipo proteinelisa试剂盒

1. 基本介绍

目标分子：载脂蛋白（Apolipoprotein）是脂蛋白中的蛋白质组分，主要包括：

ApoA-I（高密度脂蛋白主要成分）

ApoB（低密度脂蛋白主要成分）

ApoE（胆固醇逆向转运关键蛋白）

生物学特性：

分子特征：

ApoA-I：28kDa，含243个氨基酸

ApoB-100：550kDa，肝脏合成

ApoE：34kDa，多态性（E2/E3/E4）

 生理功能：

脂质运输和代谢调控

细胞胆固醇外流促进

炎症反应调节

动脉粥样硬化发生发展

研究意义：

动脉粥样硬化模型评估

脂代谢紊乱研究

心血管疾病风险评估

阿尔茨海默病研究（ApoE4关联）

检测原理

双抗体夹心ELISA法（以ApoA-I为例）：

捕获抗体：微孔板包被抗兔ApoA-I单抗

样本孵育：ApoA-I与固相抗体结合

检测抗体：加入HRP标记的抗ApoA-I多抗

显色系统：TMB显色，450nm测定吸光度

试剂盒组成

组分  规格  保存条件  关键说明

预包被微孔板  96T（可拆）  2-8℃  密封干燥保存

Apo标准品  0.5-50 μg/mL  -20℃  冻干粉需精密复溶

酶标抗体  1.2mL  -20℃（避光）  HRP标记

样本稀释液  25mL  2-8℃  含去垢剂

TMB底物  10mL  2-8℃（避光）  开封后1月有效

终止液  10mL  室温  强酸注意防护

脂质去除剂  10mL  2-8℃  处理高脂样本

样本要求

适用样本类型：

血清（推荐无抗凝管）

血浆（EDTA抗凝，避免肝素）

动脉组织匀浆（需特殊处理）

脑脊液（检测ApoE时）

样本处理规范：

采集后立即离心（3000×g，15分钟，4℃）

高脂样本处理：

加入等体积脂质去除剂

4℃静置30分钟后离心

分装保存于-80℃（冻融≤3次）

 检测流程

标准操作程序：

标准曲线制备：

梯度稀释：0.5、1、5、10、20、50 μg/mL

每孔100μL，复孔检测

关键步骤参数：

孵育温度：37±0.5℃

孵育时间：

样本孵育：90±5分钟

酶标抗体：60±3分钟

洗涤程序：300μL/孔，洗5次（浸泡30秒/次）

显色控制：TMB避光反应15±1分钟

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