多功能氧化酶（(mixed function oxidase，MFO）试剂盒说明书
微量法100T/96S
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
多功能氧化酶又称混合功能氧化酶，可产生降解反应，可使原化学物质变为低毒的或无毒的物质从体内排出；还可产生激活反应，可使原化学物质转化为具有亲电子性质，导致毒性增强，成为致突变物或终致癌物。近年来对混合功能氧化酶系与外源性化学物质相互作用的深入研究，对于从分子生物学水平上进一步了解外源性化学物质的毒作用具有重要意义。
测定原理：
MFO催化对硝基苯甲醚产生对硝基苯酚，在400nm下有特征吸光值。
组成：
产品名称 | AO033-100T/96S | Storage |
提取液：液体 | 120ml | 4℃ |
试剂一：液体 | 24ml | 4℃避光 |
试剂二：粉剂 | 3管 | 4℃ |
试剂三：液体 | 24ml | 4℃ |
试剂四：液体 | 64ml | 4℃ |
说明书 | 一份 |
试剂二：粉剂×3管，-20℃保存；临用前取一管加入1.5ml水溶解，现配现用。
自备仪器和用品：
酶标仪、台式离心机、可调式移液器、96孔板、研钵、冰、蒸馏水、氯仿。
粗酶液提取：
按照组织质量（g）：提取液（ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml提取液），进行冰浴匀浆。12000g 4℃离心20min，取上清，置冰上待测。
测定步骤：
酶标仪预热30min以上，调节波长至400nm。
2、在EP管中依次加入如下试剂
试剂名称（μl） | 测定 | 空白 |
试剂一 | 200 | 200 |
试剂二 | 40 | 40 |
提取液 | 160 | 360 |
样本 | 200 |
|
混匀，37℃水浴30min |
试剂三 | 200 | 200 |
分别加入1000μl氯仿，充分混匀萃取，静置10min，取下层氯仿层0.6ml至新的EP管中。再加入试剂四0.6ml，充分混匀萃取，取上层水相0.2ml于96孔板中，400nm下测定吸光值A测定与A空白，△A=A测定-A空白。空白管只需测一管。
MFO活性计算:
标准曲线：y = 0.0119x + 0.0021，R2 = 0.9997；y，吸光度；x,标准品浓度，单位nmol/ml。
按样本质量计算
单位定义：每g样本每分钟产生1nmol对硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
MFO（nmol/min/g 鲜重）=（△A-0.0021）÷0.0119×V总÷(V样÷V样总×W)÷T
=8.4×（△A-0.0021）÷W
按样本蛋白浓度计算
单位定义：每mg组织蛋白每分钟产生1nmol对硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
MFO（nmol/min/mg prot）=（△A-0.0021）÷0.0119×V总÷(V样×Cpr)÷T
=8.4×（△A-0.0021）÷Cpr
V总：最终萃取液体积，0.6 ml；V样：反应中样品体积，200μl；T：反应时间，30min；W：样品质量，g；Cpr：样本蛋白浓度，mg/ml。
其他推荐产品：
| SA025/SA026 | 胰α-淀粉酶抑制剂检测试剂盒 |
| SA009/SA010 | α-淀粉酶（α-AL）检测试剂盒 |
| SA011/SA012 | β-淀粉酶（β--AL）检测试剂盒 |
| SA005/SA006 | 可溶性淀粉合成酶（SSS）检测试剂盒 |
| KB061/KB063 | 总淀粉含量检测试剂盒 |
| KB058/KB059 | 抗性淀粉检测试剂盒 |
| KB056/KB062 | 支链/直链/总淀粉含量检测试剂盒 |
| SA007/SA008 | 淀粉分支酶检测试剂盒 |
| SA019/SA020 | 淀粉脱分支酶检测试剂盒 |
| SA003/SA004 | 结合态淀粉合成酶（GBSS）检测试剂盒 |
关键字： 多功能氧化酶;多功能氧化酶(MFO);试剂盒;
伊势久（江苏连云港）生物科技有限责任公司，成立于2019年，坐落于新亚欧大陆桥东方桥头堡连云港市。公司由资深行业专家和双一流高校博士联合创办，主要从事生化检测、病理检测和原料酶等相关试剂的研发和生产。
我司位于联东U谷科技创新谷内的2000平米的生产、研发基地已建成投入运行，其中包括150平米的超十万级的洁净车间。我司坚持以自主研发为核心，现已生产出的脲酶、tRNA转运核糖核酸、刀豆球蛋白、胰蛋白酶抑制剂等产品，热销市场以来收到了客户的广泛好评。
公司秉承“ 挚诚科研、匠心传承” 的发展理念，聚焦于前沿生物技术的应用和创新，努力成为生物科技领域的标杆企业。坚持以客户为中心，致力于为中国的科研工作者提供高品质的产品和专业服务，始终是我们努力的目标和方向。