产品名称
小鼠CCL3(MIP-1α)elisa试剂盒
英文名称
Mouse CCL3(MIP-1α) ELISA Kit
分类
Mouse/小鼠Elisa试剂盒
检测范围
灵敏度
货号
PM33654
检测种属:Mouse
用途:科研定量检测(不可用于临床诊断)
检测原理
采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA):
包被:微孔板预包被小鼠CCL3特异性捕获抗体。
反应:依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。
显色:TMB底物在HRP催化下显蓝色,酸化后转为黄色,颜色深度与样本中CCL3浓度正相关。
读数:450nm波长测定OD值,通过标准曲线计算浓度。
试剂盒组成
| 组分 | 48T配置 | 96T配置 |
| 预包被微孔板 | 1块 | 1块 |
| 标准品 | 6浓度梯度 | 6浓度梯度 |
| HRP标记抗体 | 1瓶 | 1瓶 |
| TMB底物液 | 10mL | 10mL |
| 终止液 | 10mL | 10mL |
| 封板膜 | 2张 | 2张 |
样本要求
血清:无热原试管采集,3000×g离心10分钟分离。
血浆:EDTA/肝素抗凝,3000×g离心30分钟取上清。
组织匀浆:PBS缓冲液制备,离心后取上清。
保存:短期(24h)置于4℃;长期需分装存于-20℃或-80℃,避免反复冻融。
操作步骤
加样:标准品/样本各100μL加入对应孔,37℃孵育90分钟。
洗涤:弃液后拍干,PBST洗涤3次。
加抗体:每孔加入HRP标记抗体100μL,37℃孵育60分钟。
显色:加入TMB底物避光反应15分钟,终止液终止反应。
检测:450nm读取OD值,标准曲线拟合计算浓度。
注意事项
试剂使用前平衡至室温,避免交叉污染。
标准曲线需随每次实验重新制备。
若样本浓度超出标准范围,建议稀释后复测。
技术参数
灵敏度:≤5 pg/mL
检测范围:15–1000 pg/mL
批内变异系数:<10%
批间变异系数:<15%
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