产品介绍:

小鼠CCL3(MIP-1α)ELISA试剂盒是一种用于定量检测小鼠生物样本(如血清、血浆、细胞培养上清液等)中CCL3(巨噬细胞炎性蛋白-1α)浓度的免疫分析工具,广泛应用于免疫学、炎症研究和临床科研等领域。
产品名称 | 小鼠CCL3(MIP-1α)elisa试剂盒 | 英文名称 | Mouse CCL3(MIP-1α) ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A129867 |

检测原理
试剂盒采用双抗体夹心法进行检测:
抗小鼠CCL3的特异性抗体预包被于酶标板上。
样品或标准品中的CCL3与包被抗体结合,未结合成分被洗去。
加入生物素化的检测抗体,与已结合的CCL3形成免疫复合物。
随后加入酶标记的亲和素(如HRP),与生物素特异性结合。
加入显色底物(如TMB),在酶催化下产生颜色反应,颜色深浅与CCL3浓度成正比。
最后加入终止液,使用酶标仪在450 nm波长处测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中CCL3的浓度。
关键产品参数

检测范围:不同品牌有所差异,常见为7.8 pg/ml~500 pg/ml或4.1 pg/ml~1000 pg/ml。
灵敏度:最低可检测浓度通常低于10 pg/ml,部分可达1.95 pg/ml。
特异性:可检测天然和重组小鼠CCL3,与其他相关细胞因子无明显交叉反应。
样本类型:适用于血清、血浆(肝素、EDTA抗凝)、细胞培养上清、组织匀浆等多种生物样本。
检测时间:通常2-3小时,部分快速试剂盒可在90分钟内完成。
操作步骤(简化)

试剂准备:将试剂盒组分平衡至室温,配制所需工作液。
加样:将标准品和待测样品加入相应孔中,建议做双孔检测以提高数据可靠性。
孵育:室温或37℃孵育,使抗原-抗体充分结合。
洗涤:洗板3-5次,去除未结合物质,手工或自动洗板均可。
加检测抗体:加入生物素化抗体,继续孵育。
再次洗涤,加入酶结合物(如SA-HRP),孵育。
显色与终止:加入显色底物(如TMB),避光显色,最后加入终止液。
读数与计算:在酶标仪450 nm处读取OD值,绘制标准曲线,计算样品浓度。
试剂盒组成(典型)

预包被抗体的96孔板(可拆条)
标准品(冻干粉,需复溶)
生物素化检测抗体
酶结合物(如HRP-亲和素)
洗涤液(浓缩型,需稀释)
显色底物(TMB)
终止液
样品稀释液
封板膜
说明书
注意事项

样本避免反复冻融,建议分装保存
严格避免交叉污染,使用一次性吸头
洗涤过程要充分,避免背景偏高
显色过程避光,终止后及时读数
不同批号试剂不可混用
试剂盒应在2-8℃避光保存。
主要优点缺点

维度 优势 (Pros) 劣势 (Cons)
检测性能 灵敏度极高,特异性强,结果准确 可能存在交叉反应,易受干扰物影响
操作体验 流程标准化,无需昂贵设备,适合高通量检测 步骤多且繁琐,耗时较长,对操作技巧有要求
经济成本 适合大批量样本检测,长期看性价比尚可 单次试剂成本较高,且不同批次可能存在差异
应用范围 可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本 对样本质量(如是否溶血)敏感
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试剂与样本准备阶段

温度平衡(最容易被忽视的点)
操作: 从冰箱取出的试剂盒(包括标准品、酶标试剂、样品等)必须在室温(18-25℃)下平衡 30 分钟。
后果: 冷试剂直接使用会导致孔内温差,产生冷凝水或非特异性背景,严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液: 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配: 酶标试剂和显色液(如 TMB)对光和热敏感,建议在使用前配制工作液,避免失效。
样本处理
避免溶血: 血清样本如果发生溶血(红细胞破裂),会释放过氧化物酶,导致假阳性或背景过高。
离心去杂质: 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心,去除沉淀和悬浮物,防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数: 如果样本浓度过高,超出标准曲线范围,必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
关键字: 小鼠;CCL3 MIP-1α;ELISA试剂盒;
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