Cy5-大黄素/CY5-Emodin/Emodin-Cyanine5 conjugate/近红外荧光标记蒽醌类探针
组成单元:大黄素为活性核心,是从大黄、虎杖等植物中提取的蒽醌类天然产物,通过作用于炎症通路(如 NF-κB)、抑制肿瘤细胞增殖等发挥生物活性;Cy5 为荧光标记基团,通过与大黄素分子中的羟基(-OH,主要为 C1、C3、C8 位羟基)经活化后形成的共价键(如醚键、酯键)实现偶联,偶联位点优先选择不影响大黄素活性中心(蒽醌母核及关键羟基)的基团,确保生物活性保留;
物理状态:常规为深蓝色至紫黑色粉末,易吸潮,科研级产品纯度通常≥95%(高效液相色谱 HPLC 检测),需同时保证荧光活性与生物活性(如对肝癌细胞 HepG2 的抑制率≥70%,与纯大黄素相比下降≤15%)。
活性保留:优质的 Cy5 - 大黄素需保留大黄素的核心生物活性,其作用机制与天然大黄素一致:① 抗炎作用:抑制炎症因子(如 TNF-α、IL-6)释放,阻断 NF-κB 信号通路激活(抑制率≥60%,浓度 10 μmol/L 时);② 抗肿瘤作用:诱导肿瘤细胞凋亡(对 HepG2、A549 细胞凋亡率≥40%,浓度 20 μmol/L 时),抑制拓扑异构酶 I 活性;③ 抗菌作用:对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等有抑制作用(最低抑菌浓度 MIC≤25 μg/mL);
作用条件:生物活性最适 pH 为 6.5-7.5,最适温度为 37℃,低温环境(4-10℃)下活性可稳定保持(10℃储存 7 天活性下降≤8%),高温(>50℃)会导致蒽醌母核结构破坏(60℃处理 1 小时活性丧失约 30%);金属离子(如 Fe³⁺、Cu²⁺)会与大黄素羟基螯合,轻微降低抗炎活性(下降≤15%),而 EDTA 等螯合剂可缓解该效应;
溶解性:在纯水中溶解度较低(约 5-15 μg/mL),易溶于 N,N - 二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基亚砜(DMSO)等有机溶剂(溶解度可达 5-10 mg/mL),也可溶于含 0.1% Tween-80 的缓冲液(如 PBS,pH 7.4)中(溶解度约 80-150 μg/mL),溶解后需现配现用,长时间放置(>24 小时)易发生聚集,导致荧光淬灭与活性下降(下降≥20%)。
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