商品属性:

产品名称 | 转基因玉米品系NK603检测试剂盒(PCR-荧光探针法) | 检测方法 | 荧光PCR法 |
货号 | XG-P661 | 应用范围 | 核酸的定性检测 |
规格 | 50T | 用途 | 仅供科研研究实验 |

检测试剂盒的核心原理

与CaMV 35S检测类似,也采用实时荧光PCR(通常为TaqMan探针法),但其设计原理更具特异性。
检测靶标:品系特异性序列
这是该试剂盒的核心。它检测的不是一个通用的启动子或基因,而是外源基因插入玉米基因组后,在插入位点形成的独特“边界序列”。
这个边界序列是由外源DNA的末端序列与玉米基因组的特定序列连接而成的。
这个序列在非转基因玉米中不存在,在其他转基因玉米品系(如MON810、Bt11等)中也不存在,是NK603独一无二的“身份证”。
引物和探针设计:
试剂盒中的一对引物和一条探针,其中一个结合在插入的外源DNA序列上,另一个结合在玉米本身的内源基因组序列上。
只有当NK603特有的边界序列存在时,引物和探针才能同时结合,并在PCR扩增过程中产生特异的荧光信号。
这种设计确保了检测结果具有极高的品系特异性,可以明确无误地鉴定出NK603品系,避免与其他转基因品系或野生型玉米混淆。
主要组成部分

与CaMV 35S试剂盒类似,但组分是针对NK603设计的:
PCR反应液
热启动Taq酶
NK603品系特异性引物和探针混合液(这是核心,探针通常标记有特定颜色的荧光基团,如FAM)
阳性对照(含有NK603特定序列的DNA或质粒)
阴性对照(非转基因玉米DNA)
内标系统(通常针对玉米的内源基因,如Zein基因,使用另一种颜色的荧光基团标记,如VIC/HEX。用于验证DNA提取质量和PCR过程是否有效,防止假阴性。)
工作流程(与多重PCR结合)

在实际检测中,通常采用多重荧光PCR,即在一个反应管内同时检测多个目标:
样本DNA提取。
配制PCR反应体系: 在同一个反应孔中加入:
反应液和酶
NK603特异性引物探针组(报告基团如FAM)
内标基因引物探针组(报告基团如VIC)
待测样本DNA
上机运行: 在实时荧光定量PCR仪上运行程序。
结果分析:
内标通道(VIC)必须呈阳性:表明DNA质量和PCR过程正常。如果内标为阴性,则本次检测无效,需重新检测。
NK603检测通道(FAM)结果判定:
阳性: FAM通道出现典型的S型扩增曲线,且Ct值小于设定的阈值(如Ct<35)。表明样本中含有NK603转基因成分。
阴性: FAM通道无扩增曲线或Ct值大于阈值。表明样本中未检出NK603品系。
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关键字: 转基因玉米品系NK603;检测试剂盒;荧光PCR法;
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