转基因大米Bt（cryAc）检测试剂盒（荧光PCR法）
简介：
本试剂盒用于检测大米及其制品中是否含有源自苏云金芽孢杆菌的 “cryAc”基因。这是一种筛查型检测试剂盒，主要用于快速鉴定样品是否属于转Bt基因大米，但其本身不能直接区分具体的转基因品系。
产品名称 | 转基因大米Bt（cryAc）检测试剂盒（荧光PCR法） | 检测方法 | 荧光PCR法 |
货号 | XG-P689 | 应用范围 | 核酸的定性检测 |
规格 | 50T | 用途 | 仅供科研研究实验 |
二、 检测目标：
基因筛查：本试剂盒的核心检测目标是 “cryAc”基因。这是苏云金芽孢杆菌中众多杀虫晶体蛋白基因中的一种，对鳞翅目害虫有特效。
品系鉴定局限性：许多不同的转基因品系都可能转入了cryAc基因。例如，著名的Bt63品系转入的就是cryAc基因。因此，一个阳性结果意味着样品中检测到了cryAc基因，它可能是Bt63，也可能是其他含有cryAc基因的品系。如需确证具体品系，需要进一步使用品系特异性试剂盒。
三、 检测原理（荧光PCR法）：
其原理与前述的PCR-荧光探针法完全相同，是基于TaqMan探针的实时荧光定量PCR技术：
DNA提取：从大米样品中提取总DNA。
特异性扩增与检测：反应体系中含有针对cryAc基因序列设计的特异性引物和荧光探针。
信号释放：在PCR循环的退火/延伸阶段，DNA聚合酶水解与模板结合的探针，使报告荧光基团发光。
实时监测：仪器实时监测荧光信号。如果样品中含有cryAc基因，就会观察到荧光信号随循环数增加而显著上升，形成特征性扩增曲线。
四、 试剂盒典型组成：
PCR反应液：含有缓冲液、dNTPs、Mg2?等。
引物探针混合液：针对cryAc基因的特异性引物和荧光标记探针。
Taq DNA聚合酶。
阳性对照：通常为含有cryAc基因序列的质粒DNA。
阴性对照：无菌超纯水。
内标系统：用于检测水稻内源基因，监控DNA质量和PCR过程，有效防止假阴性结果。
五、 操作流程详解说明：
样品处理与DNA提取。
反应体系配制：将各组分按比例混合，分装到PCR管中，最后加入模板DNA。
荧光PCR扩增：
将反应管放入荧光PCR仪。
设置程序：预变性 → 多轮循环的变性、退火/延伸。
结果判读：
内标通道：必须正常扩增，否则实验无效，需重新检测。
cryAc检测通道：
阳性：出现典型的S型扩增曲线，且Ct值小于或等于判定阈值。
阴性：无扩增曲线或Ct值大于判定阈值。
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六、 技术特点与优势：
高通量筛查：非常适合对大量样品进行快速初筛，效率高。
高灵敏度与准确性：能够检测出微量的转基因成分，且通过探针技术，假阳性率低。
快速闭管检测：2-3小时内即可完成检测，且闭管操作避免了污染。
成本效益：作为筛查工具，通常比品系特异性检测成本更低。
七、 主要应用场景：
初筛检测：在市场监管、口岸检疫中，首先使用本试剂盒进行大批量筛查，快速锁定疑似阳性样品。
原料与过程控制：食品加工企业用于对进口大米原料或生产过程中的产品进行转基因成分的快速筛查。
科学研究：用于初步鉴定实验材料中是否含有Bt基因。
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