商品属性：
产品名称 | 植物内源基因tRNA-Leu检测试剂盒(荧光PCR法) | 检测方法 | 荧光PCR法 |
货号 | XG-P791 | 应用范围 | 核酸的定性检测 |
规格 | 50T | 用途 | 仅供科研研究实验 |
植物内源基因tRNA-Leu检测试剂盒是一种基于实时荧光定量PCR技术的分子诊断产品。它并非用于检测外源病原，而是用于检测植物基因组中一个高度保守的亮氨酸转运RNA基因。
该试剂盒的核心用途是作为内参照，在转基因成分检测、物种鉴定等分子检测中，确认以下关键环节是否正常：
DNA提取是否成功。
PCR反应体系是否存在抑制物。
整个实验操作流程是否规范、有效。
简单来说，一个成功的tRNA-Leu检测结果是整个实验有效的“通行证”。
二、 检测原理
其原理与常规荧光PCR法完全一致，但目标分子是植物自身的保守基因。
DNA提取：从植物样本（叶片、种子、加工产品等）中提取总DNA。
PCR扩增与实时检测：
反应体系中包含一对针对植物tRNA-Leu基因高度保守区域设计的特异性引物和一个荧光标记探针。
如果样本中含有足量、高质量的可扩增植物DNA，探针会在PCR过程中被水解，释放出荧光信号。
实时荧光PCR仪监测整个过程的荧光强度变化。
结果判定：通过分析荧光信号达到设定阈值的循环数，来判断样本中是否存在内源基因，并评估DNA质量。
三、 试剂盒组成（通常包含）
DNA提取试剂（可选）：用于从各种植物样本中提取DNA。
tRNA-Leu PCR反应液：含有特异性引物、探针、dNTPs、缓冲液等。
热启动Taq DNA聚合酶。
阳性对照：通常含有已知浓度的植物DNA（如大豆、玉米等常见作物的DNA）。
阴性对照：无核酸酶水。
四、 操作流程
样本制备与DNA提取：研磨植物组织，并使用合适的方法提取高质量DNA。
试剂配制：在PCR管中混合反应液、酶、待测DNA模板及阴阳性对照。
上机检测：
将反应管放入实时荧光PCR仪。
设置标准PCR程序：预变性（~95°C）→ 40-45个循环的 [变性 + 退火/延伸/荧光采集]。
结果分析：
实验有效性判断：
阳性对照：必须出现典型的S型扩增曲线，且Ct值在预期范围内。
阴性对照：必须无扩增曲线。
样本结果判定：
内参阳性：样本出现S型扩增曲线，且Ct值小于判定值（如Ct<30）。这证明：
样本确实含有植物成分。
DNA提取成功且质量良好。
PCR反应体系正常，无抑制物。
内参阴性：样本无扩增曲线。这表明：
要么样本中根本不含有植物成分（例如，纯淀粉）。
要么DNA提取完全失败。
要么PCR体系中存在强烈的抑制物。
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关键字： 植物内源基因tRNA-Leu;检测试剂盒;荧光PCR法;
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