商品属性：
产品名称 | 马动脉炎病毒(EAV)检测试剂盒(荧光PCR法) | 检测方法 | 荧光PCR法 |
货号 | XG-P1167 | 应用范围 | 核酸的定性检测 |
规格 | 50T | 用途 | 仅供科研研究实验 |
一、 疾病背景：什么是马动脉炎病毒？
马动脉炎病毒是马动脉炎 的病原体。这是一种高度传染的病毒性疾病，对马业构成显著威胁。
病原体：马动脉炎病毒，属于动脉炎病毒科。
主要危害：
对大多数马匹：引起发热、精神沉郁、水肿（特别是眼睑、四肢）、鼻分泌物增多等流感样症状。通常可康复。
对妊娠母马：最严重的后果是导致晚期流产或早产，是造成马病毒性流产的重要原因之一，俗称“马传贫”（需注意与马传染性贫血区分）。
对种公马：感染后约30-70%的公马会成为长期带毒者。病毒持续存在于生殖道（特别是输精管和附睾），通过精液排毒，成为最重要的传染源，但本身不表现症状。
传播途径：主要通过呼吸道飞沫和直接接触传播，更重要的是通过交配或受污染的精液（人工授精）垂直传播。
因此，快速、准确地检测EAV对于控制疫情、保护种马群和母马群至关重要。
二、 检测方法概述：为什么选择荧光PCR法？
传统的病毒分离鉴定方法耗时长、操作复杂且灵敏度低。血清学方法（如ELISA）检测的是抗体，只能说明马匹过去或现在感染过，无法区分当前感染、既往感染还是疫苗免疫反应，更无法检测出精液中的病毒。
荧光PCR法（又称实时荧光定量PCR）是目前检测EAV的金标准方法。
原理：
靶标：针对EAV特有的基因序列（如ORF5、ORF7等保守区域）设计引物和荧光探针。
扩增与检测：在PCR反应过程中，探针与目标DNA序列结合后被Taq酶切割，释放出荧光信号。每完成一次扩增循环，信号就增强一次。
实时监控：仪器实时监测荧光强度的变化，从而实现对病毒核酸的定性和定量检测。
核心优势：
高灵敏度：能检测出极低剂量的病毒，适用于早期诊断和隐性带毒公马的筛查。
高特异性：针对病毒独特基因，不会与其他病原体发生交叉反应，结果准确可靠。
快速高效：整个检测流程可在2-4小时内完成，为临床决策争取宝贵时间。
定量能力：可以测定病毒载量（Ct值），有助于评估感染严重程度和排毒水平。
安全性高：检测的是病毒核酸，无需操作活病毒，降低了生物安全风险。
三、 试剂盒组成
一个典型的EAV荧光PCR试剂盒包含以下核心组分：
PCR反应液：含有缓冲液、dNTPs、镁离子等PCR反应所需成份。
酶混合物：通常为热启动Taq DNA聚合酶，减少非特异性扩增。
EAV荧光PCR反应液：已预先混好针对EAV的特异性引物和荧光探针（通常用FAM或VIC等荧光基团标记）。
阳性对照：含有灭活的EAV病毒或含有EAV目标基因片段的质粒DNA，用于验证整个实验体系是否有效。
阴性对照：无核酸水，用于监控实验过程中是否存在污染。
内标（Internal Control, IC）：非常重要的组分。通常与样本一起提取和扩增，用于监控从核酸提取到PCR扩增的每一步是否成功，有效避免因操作失误或抑制剂导致的假阴性结果。内标的探针通常用不同于EAV的颜色标记（如CY5或ROX）。
四、 检测操作流程
重要前提：实验必须在分区明确的PCR实验室进行（试剂准备区、样本处理区、扩增及产物分析区），以防止气溶胶污染。
样本采集与处理：
样本类型：
疑似病例：鼻拭子、全血（EDTA抗凝）、组织（如流产胎儿的心、肺、脾）。
带毒公马筛查：精液是最关键的样本。
核酸提取：使用商业化的病毒DNA/RNA提取试剂盒从样本中提取病毒核酸（EAV是RNA病毒，需先提取总RNA，然后进行逆转录）。提取质量和效率是成功的关键。
试剂配制与加样：
在试剂准备区，按说明书比例配制PCR预混反应体系（PCR反应液 + 酶 + EAV荧光反应液）。
将预混液分装至PCR反应管中，然后加入提取好的样本RNA、阳性对照和阴性对照。
荧光PCR扩增：
将反应管放入实时荧光PCR仪。
设置循环程序（示例）：
逆转录：50°C， 10-30分钟（将病毒RNA逆转录为cDNA）。
预变性：95°C， 2-5分钟（激活酶并使模板变性）。
循环扩增（40-45个循环）：
变性：95°C， 10-15秒。
退火/延伸：60°C， 30-60秒（在此阶段采集荧光信号）。
结果分析：
仪器软件自动生成扩增曲线并计算Ct值。
公司正在出售的产品：
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轴突相关粘附分子抗体 | 石蜡切片组织RHO 蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 |
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关键字： 马动脉炎病毒;检测试剂盒;荧光PCR法;
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