商品属性:

大豆内源基因检测试剂盒(恒温荧光法)是一种用于检测大豆内源基因(如热休克蛋白基因)的分子生物学工具,基于恒温荧光检测技术,具有高灵敏度、操作简便的特点,适用于转基因成分筛查、食品/饲料检测等领域。
产品名称 | 大豆内源基因检测试剂盒(恒温荧光法) | 检测方法 | 荧光PCR法 |
货号 | XG-P1499 | 应用范围 | 核酸的定性检测 |
规格 | 50T | 用途 | 仅供科研研究实验 |
原理与技术特点
检测原理:采用恒温荧光检测技术,针对大豆内源基因的特异核酸片段(如热休克蛋白基因保守区域)进行扩增,仪器实时监测扩增过程中的荧光信号变化,自动判读结果。
核心优势:无需复杂PCR仪,仅需恒温荧光检测仪(如Dhelix系列、Genie II等),操作快速,适合现场或高通量检测。
产品规格与组成

包装规格:常见为48T/盒(部分品牌提供96T),包含反应液、酶液、阳性质控品(PG-Lectin-I)、阴性质控品(NG-I)等组分。
检出限:0.1%(可检测样品中大豆成分的最低含量)。
保存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融,有效期一般12个月。
操作流程与特点

严格分区操作(防止污染):
第一区(试剂准备):反应液配制(需在冰盒上操作)
第二区(样本制备):模板DNA提取(推荐配套植物基因组DNA提取试剂盒)
第三区(模板添加):向反应管中加入模板(需在冰盒上操作,顺序为NG-I、待测样品、PG-Lectin-I)
第四区(扩增及产物分析):恒温荧光扩增及结果判读
关键操作步骤:

试剂配制:按待检样品数(N)计算用量(N+2,含阴性、阳性对照),将反应液分装至PCR管,加入C-I(约20μL)。
模板制备:使用植物基因组DNA提取试剂盒提取大豆DNA,具体过程详见说明书。
扩增反应:恒温仪器63℃反应45分钟;若使用荧光定量PCR仪,则设置63℃ 15秒、63℃ 45秒为一个循环,45个循环。
结果判定:仪器自动判读(阳性显示“S”型扩增曲线,阴性无曲线或Ct≥40);NG反应阴性、PG反应阳性为有效结果。
操作特点:

高灵敏度:可检测0.1%大豆成分,适合微量筛查
快速高效:全程约1.5-2小时,远快于传统PCR
防污染设计:分区操作、禁止开盖、使用密封袋丢弃扩增管
注意事项与质量控制

防污染措施:实验分区物理隔离,穿戴专用实验服和乳胶手套,使用一次性吸头和专用工具。
质量控制:每次检测需设置阴性对照(无扩增曲线)和阳性对照(Ct≤35或“S”型曲线),确保结果有效性;不同批号试剂勿混用。
应用领域与局限性
应用领域:主要用于转基因大豆筛查、食品/饲料中大豆成分检测(如豆制品、婴幼儿辅食、饲料等)。
局限性:检测结果受样本提取质量影响,可能存在假阳性或假阴性风险;仅限科研使用,严禁临床诊断。
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关键字: 大豆内源基因;检测试剂盒;恒温荧光法;
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