草鱼出血病II型病毒（GCRV II）RNA检测试剂盒（恒温荧光法）
试剂简介：
检测目标：特异性检测草鱼出血病II型病毒（Grass Carp Reovirus II, GCRV II），该病毒是引致草鱼出血病的主要病原体，可导致鱼体充血、肝脾坏死等高死亡率病症。
方法原理：基于恒温荧光扩增技术（如RT-LAMP或RPA），靶向GCRV II的S7基因（编码RNA聚合酶），通过荧光染料（如SYTO 9）或探针实时监测扩增信号，60-65℃恒温反应，无需复杂热循环仪。
适用样本：鱼体组织（肝、脾、肾）、水体滤膜、鱼卵等。
产品名称 | 草鱼出血病II型病毒（GCRV II）RNA检测试剂盒（恒温荧光法） | 分类 | 荧光PCR |
货号 | XG-P1553 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
检测流程
样本处理
组织样本：取50 mg组织匀浆，加入TRIzol裂解后离心取上清。
水体样本：0.22 μm滤膜过滤浓缩，或直接离心富集病毒颗粒。
RNA提取
推荐快速提取法（如磁珠法或煮沸法），需加入RNA酶抑制剂防止降解。
恒温扩增
反应体系：
引物：6条特异性引物（靶向S7基因保守区）。
荧光染料：SYTO 9（实时监测）或钙黄绿素（终点检测）。
反应条件：65℃恒温扩增30分钟，荧光信号每30秒采集一次。
结果判读
阳性：荧光信号指数增长且ΔRn≥0.5。
阴性：无显著荧光升高（需排除RNA降解或抑制物干扰）。
3. 性能参数
指标 参数要求
灵敏度 ≤100 copies/μL
特异性 不与GCRV I/III型或其他鱼类呼肠孤病毒交叉
检出限 95%检出率（10^2 copies/mg组织）
抗干扰性 耐受10%鱼体黏液或水体腐殖酸
4. 注意事项
假阴性控制：
病毒RNA易降解，样本需立即检测或-80℃保存。
水体样本需浓缩（如超滤离心）以提高检出率。
生物安全：操作需在生物安全柜中进行，避免气溶胶污染。
质控要求：每批次需包含：
阴性对照（健康鱼组织提取RNA）。
阳性对照（含S7基因体外转录RNA）。
5. 应用场景
水产养殖：草鱼苗种检疫、发病鱼群快速诊断。
疫病防控：养殖场水体病毒监测，阻断垂直传播（鱼卵消毒效果评估）。
科研领域：GCRV II分子流行病学研究。
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关键字： 草鱼出血病II型病毒;检测试剂盒;恒温荧光法;
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