小鼠ICAMelisa试剂盒
产品简介:
检测原理
试剂盒采用双抗体夹心法(Sandwich ELISA),利用特异性抗体捕获并结合样本中的ICAM蛋白,再通过酶标记的抗体显色,从而实现定量检测。
英文名称 | Mouse ICAM ELISA Kit | 产品类别 | Mouse/小鼠Elisa试剂盒 |
货号 | A129931 | 规格 | 48T/96T |
主要组成
预包被抗体的酶标板:已包被针对ICAM的捕获抗体。
生物素标记的检测抗体:用于与ICAM结合。
酶标记的链霉亲和素(HRP-Streptavidin):与生物素标记抗体结合,催化显色反应。
标准品:用于绘制标准曲线,计算样本浓度。
洗涤液、底物液(TMB)、终止液:用于洗涤和显色反应。

检测步骤
加样:将标准品和样本加入酶标板孔中。
温育:使ICAM与捕获抗体充分结合。
洗涤:去除未结合的物质。
加酶标抗体:加入生物素标记的检测抗体和酶标记的链霉亲和素。
显色:加入底物液,酶催化显色反应。
终止:加入终止液,终止反应。
测定:酶标仪测定吸光度,计算ICAM浓度。
注意事项
样本处理:血清、血浆等样本需正确采集和保存,避免反复冻融。
操作规范:严格按说明书操作,避免交叉污染,确保实验准确性。
试剂保存:标准品需避光保存,其他试剂按要求储存。
应用领域
主要用于科研领域,研究ICAM在炎症、免疫反应等过程中的作用。
注意事项
严格按照说明书操作,避免交叉污染和非特异性结合。
样本避免反复冻融,未用完的板条密封冷藏(2-8℃)保存。
试剂盒组分不可混用,标准品建议一次性使用。
血浆、血清及组织样本需规范处理,避免溶血和杂质干扰。
该试剂盒具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特点,是兔MIP-3α/CCL20定量检测及相关疾病机制研究的可靠工具,广泛应用于兔免疫、炎症、感染等领域的科研。
常见问题解答 (FAQ)
Q1: 为什么要做“复孔”?
A: 建议每个样本(包括标准品)都做复孔(2-3个孔)。这样可以计算平均值,减少操作误差,提高数据的可信度。
Q2: 样本需要稀释吗?
A: 是的。如果样本浓度过高,超出了标准曲线的检测范围,需要根据预实验结果进行适当稀释。计算最终浓度时,记得乘以稀释倍数。
Q3: 结果出现“花板”(背景不均)怎么办?
A: 可能原因包括:洗板不干净、温育温度不均、加样时产生气泡、或者试剂(如底物)受光照分解。请检查洗板机是否堵塞,确保温育箱温度恒定。
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如何验证试剂盒的特异性?(实操建议):
稀释线性实验 (Linearity):
操作: 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释(如1:2, 1:4, 1:8...)。
预期: 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系(相关系数 R² ≥ 0.98)。如果线性不好,说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test):
操作: 在已知浓度的目标抗原溶液中,加入高浓度的潜在干扰物(如高浓度的脂质或结构类似物),检测其对结果的影响。
预期: 若检测值与理论值偏差在±10%以内,说明抗干扰能力强,特异性好。
回收实验 (Recovery Test):
操作: 在样本中加入已知量的标准品,检测总含量,计算回收率。
预期: 回收率在80%-120%之间,说明试剂盒能准确识别目标,不受样本背景干扰。
关键字: 小鼠;ICAM ;ELISA试剂盒;
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